一种新的介导细胞间粘附的肌动蛋白相关蛋白KIAA1522在食管癌中作用及其机制的研究

目录

图表索引

英文缩略语

摘要

前言

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法

结果

一、食管癌组织及细胞系中KIAA1522基因及蛋白表达情况

1．KIAA1522蛋白在食管癌组织中表达上调

2．食管癌组织和细胞系中KIAA1522四个转录本表达情况

3．食管癌及模式细胞系中KIAA1522蛋白表达位置的确定

二、食管癌细胞贴壁状态下，KIAA1522通过转录水平正调控IQGAP1的表达，从而促进细胞的增殖

1．食管癌细胞系中KIAA1522敲降后对细胞增殖、凋亡、周期的影响

2．食管癌细胞系中KIAA1522敲降下调IQGAP1及p-S6K蛋白的表达

3．食管癌细胞系IQGAP1敲降抑制细胞增殖

4．食管癌细胞系中KIAA1522通过转录水平，而不通过蛋白降解途径调控IQGAP1的表达

三、食管癌细胞悬浮状态下，KIAA1522通过正向调控IQGAP1的表达，促进细胞骨架多聚化、细胞粘附连接形成，抑制细胞失巢凋亡

1．食管癌细胞系中KIAA1522敲降对细胞失巢凋亡，悬浮细胞聚团，细胞骨架形态的影响

2．食管癌细胞系中KIAA1522敲降下调粘附相关蛋白、细胞骨架相关蛋白及粘附相关激酶的表达

3．食管癌细胞系中IQGAP1敲降对细胞失巢凋亡，悬浮细胞聚团的影响

5．食管癌细胞系中KIAA1522与粘附相关蛋白IQGAP1、CTTN及β-catenin存在蛋白共定位及相互作用

四、结直肠癌细胞系中IQCAP1通过正向调控ERK活化，从而抑制细胞失巢凋亡

1．结直肠癌组织中IQGAP1蛋白表达上调，与淋巴结转移和临床分期呈正相关

2．结直肠癌细胞系中IQGAP1敲降促进悬浮细胞失巢凋亡，抑制细胞聚团；但不影响贴壁细胞凋亡及粘附

3．结直肠癌细胞悬浮状态下，IQGAP1敲降抑制粘附连接相关分子的表达，ERK及S6K蛋白的活化

4．IQGAP1稳定敲降的结直肠癌细胞系细胞形态发生变化、粘附相关分子表达减少、细胞失巢凋亡增加

5．肺癌、食管癌细胞系悬浮状态下，IQGAP1敲降能抑制ERK活化并促进细胞失巢凋亡发生

讨论

一、食管癌中癌基因KIAA1522转录本表达及蛋白条带位置确定

1．食管癌中KIAA1522转录本1为其主要表达形式

2．食管癌细胞及模式细胞系中KIAA1522蛋白条带位置为170KD

3．KIAA1522是一种新的肿瘤相关蛋白，可能通过促进细胞增殖和抗失巢凋亡发挥癌蛋白功能

二、食管癌中KIAA1522蛋白促进细胞增殖及其机制的初步探索

1．KIAA1522通过转录水平，而非蛋白降解水平调控IQGAP1蛋白表达

2．S6K信号通路介导了KIAA1522基因敲降引起的细胞增殖抑制作用

3．贴壁状态下KIAA1522促进细胞增殖，而对细胞凋亡、细胞周期影响不显著

三、食管癌中KIAA1522通过调控IQGAP1表达影响细胞间粘附形成、抵抗细胞失巢凋亡

1．悬浮细胞中KIAA1522蛋白敲降引起粘附连接中Cadherin／Catenin复合体、Actin多聚化蛋白及相关调控激酶的表达减少，细胞间粘附作用减弱

2．KIAA1522基因敲降引起的细胞失巢凋亡增加可能受粘附作用减弱影响

3．IQGAP1蛋白在KIAA1522基因敲降引起的细胞间粘附减弱及失巢凋亡增加过程中发挥重要作用

4．KIAA1522可能是一种Actin相关的脚手架蛋白，参与Actin多聚化及细胞粘附过程

四、结直肠癌中IQGAP1蛋白高表达及其通过调控细胞间粘附影响细胞抗失巢凋亡作用

1．IQGAP1蛋白在结直肠癌中表达上调，并可能促进肿瘤转移过程

2．结直肠癌中IQGAP1通过调控S6K／S6、MEK／ERK信号通路影响细胞间粘附及细胞失巢凋亡

五、IQGAP1蛋白活化ERK信号通路是食管癌、结直肠癌、肺癌细胞中是一种普遍的抗失巢凋亡机制，及其与KIAA1522蛋白相互调控关系的讨论

1．IQGAP1对于ERK信号通路的活化是悬浮肿瘤细胞中普遍存在的一种抗失巢凋亡机制

2．IQGAP1与KIAA1522、CTTN蛋白之间相互调控关系的讨论

结论

附录

参考文献

文献综述 细胞骨架动态性在肿瘤细胞侵袭转移中的作用

致谢

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