模拟海拔5,000米低氧复合持续光照环境对SD大鼠HPA轴的影响

摘要

第一部分、模拟海拔5，000米低氧复合持续光照环境对SD大鼠HPA轴的影响
　　背景和目的：医学意义上的高原系指海拔3，000米以上，能使机体产生生物学效应的环境和高度。高原低氧环境使机体各系统从器官水平到分子水平，从功能到组织结构发生一系列变化，其中包括激活下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴（Hypothala mic-pituitary-adre nal axis，HPA axis）。光周期的变化也会引起机体HPA轴激素分泌紊乱。本课题组发现第29次中国南极考察冰盖队员在昆仑站（海拔4，087米）特殊环境下激素分泌紊乱，故探讨低氧复合持续光照环境对机体HPA轴的交互作用，为极地医学提供科学数据。
　　方法：采用低压低氧舱模拟海拔5，000米低氧环境，并给予持续日光灯照明(光照强度190lux)，构建低氧复合持续光照动物模型。96只成年SD大鼠随机分为空白对照组（Control group，C组）、低氧组（Hypoxia group，H组）、持续光照组(Co nstantlight group，CL组)以及低氧复合持续光照组（Hypoxia and constant light group，HL组），分别暴露2天、5天及10天。ELISA法检测血浆皮质酮(CORT)和促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)水平，实时荧光定量RT-PCR检测下丘脑室旁核(PVN)区CRF及其受体CRFR1和CRFR2、垂体CRFR1和CRFR2表达水平，免疫组织化学染色观察下丘脑PVN区CRF的表达水平。
　　结果：
　　1）在分别暴露1天后，H组和HL组大鼠摄食量和体重下降都最为明显，H组摄食量由20.0g/d（暴露0天时）下降至1.4g/d，平均体重由181.6±15.8g（暴露0天时）下降至155.0±14.3g（与C组相比，P＜0.001）;HL组摄食量由18.8g/d（暴露0天时）下降至4.0g/d，平均体重由185.7±5.6g（暴露0天时）下降至166.2±6.5g（与C组相比，P＜0.001）。
　　2)在分别暴露2天、5天及10天后，H组和HL组大鼠血浆CORT和CRF水平都显著升高（与C组相比，P＜0.01），但CL组大鼠血浆CORT和CRF水平都无明显改变（与C组相比，P＞0.05）。H组血浆CORT和CRF水平均随暴露时间延长而逐渐升高(F=21.111，P=0.000;F=5.886，P=0.013)，HL组血浆CORT和CRF水平均随暴露时间延长而逐渐升高(F=16.739，P=0.000; F=6.389，P=0.010)。与H组相比，在分别暴露2天、5天和10天后，HL组大鼠血浆CORT和CRF水平均显著下降（P＜0.05）。
　　3)与C组相比，在分别暴露2天后，H组和HL组大鼠下丘脑PVN区CRF及CRFR1 mRNA、垂体CRFR1 mRNA表达水平都显著上调（P＜0.05）;HL组大鼠下丘脑PVN区和垂体CRFR2 mRNA表达水平亦显著上调（P＜0.05）。
　　结论：
　　1）5，000连续低氧和5，000米连续低氧复合持续光照暴露10天内能够抑制大鼠的摄食量，降低大鼠的体重。
　　2)5，000连续低氧和5，000米连续低氧复合持续光照暴露10天内能够显著激活大鼠HPA轴，而持续光照（光照强度190 lux）并未明显影响大鼠HPA轴活性。此外，在暴露10天内，5，000连续低氧复合持续光照激活HPA轴的作用要明显弱于低氧本身。
　　3)在5，000连续低氧和5，000米连续低氧复合持续光照分别暴露2天后，HPA轴的激活与下丘脑PVN区CRF及CRFR1 mRNA、垂体CRFR1 mRNA表达水平的显著上调密切相关。此外，在5，000米连续低氧复合持续光照暴露2天后，HPA轴的激活还与下丘脑PVN区以及垂体CRFR2 mRNA表达水平的显著上调密切相关。
　　第二部分、少年儿童体质表型维度与血清肝酶水平相关分析
　　目的：探讨黑龙江省少年儿童体质表型维度体重指数(BMI)、腰围(WC)、腰围身高比(WhtR)和血清肝酶水平的关系。
　　方法：随机抽取黑龙江省部分地区10～18岁健康少年儿童2，011人（男性902人，女性1，109;汉族1，177人，朝鲜族834人），测量身高、体重和腰围，速率法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及γ-谷氨酰转移酶(GGT)活性，并采用Pearson相关分析和多元逐步回归等统计学方法分析BMI、WC、WhtR与血清肝酶水平的关系。
　　结果：无论性别，受试者年龄与血清LgALT和LgGGT水平均呈正相关（男性r值分别为0.100、0.262，女性r值分别为0.086、0.072，P值均＜0.05），而与血清LgAST水平均呈负相关（男性r值为-0.201，女性r值为-0.227，P值均＜0.001）。血清LgALT、LgAST及LgGGT水平在11～18岁少年儿童中均存在性别差异，同年龄段男性均高于女性(P＜0.05)。无论性别，朝鲜族少年儿童血清LgALT水平均高于同性别汉族少年儿童(P＜0.001)。无论性别，超重组和肥胖组少年儿童血清LgALT和LgGGT水平均明显高于同性别BMI正常组（P＜0.01），且男性肥胖组少年儿童血清LgALT、LgAST及LgGGT水平均明显高于同性别超重组(P＜0.05)。对不同性别少年儿童血清肝酶水平与年龄、民族、BMI、WC、WhtR进行多元逐步回归分析，男性少年儿童血清LgALT水平主要受年龄、民族、WhtR影响，LgAST仅受年龄影响，LgGGT主要受年龄、BMI、WhtR影响;而女性少年儿童血清LgALT水平主要受民族、WhtR影响，LgAST主要受年龄、WC、WhtR影响，LgGGT仅受BMI影响。
　　结论：无论性别，少年儿童BMI和WhtR升高可能是血清ALT和GGT水平升高的风险因素。

目录

第一部分 模拟海拔5，000米低氧复合持续光照环境对SD大鼠HPA轴的影响

摘要

缩略词表

1．前言

2．技术路线

3．材料与方法

3．1 实验动物

3．2 模拟低氧应激

3．3 取材

3．4 大脑内核团定位和微取样

3．5 实时荧光定量RT-PCR

3．6 免疫组织化学染色检测下丘脑PVN区神经肽CRF的表达

3．7 ELISA法检测血浆CORT和CRF水平

3．8 数据统计分析

4．实验结果

4．1 模拟海拔5，000米低氧复合持续光照环境对SD大鼠进食量和体重的影响

4．2 模拟海拔5，000米低氧复合持续光照环境对sD大鼠血浆CORT和CRF水平的影响

4．3 模拟海拔5，000米低氧复合持续光照环境对下丘脑室旁核区CRF表达的影响

4．4 模拟海拔5，000米低氧复合持续光照环境对下丘脑室旁核区CRFR1和CRFR2表达的影响

4．5 模拟海拔5，000米低氧复合持续光照对垂体CRFR1和CRFR2表达影响

5．讨论

6．小结

参考文献

文献综述 高原低氧复合持续光照环境对神经-内分泌-免疫网络的影响

第二部分 少年儿童体质表型维度与血清肝酶水平相关分析

摘要

1．前言

2．资料与方法

2．1 一般资料

2．2 检测方法

3．结果

3．1 体质表型维度及血清肝酶水平

3．2 不同性别BMI正常组、超重组和肥胖组少年儿童血清肝酶水平比较

3．3 不同性别少年儿童血清肝酶水平与年龄、BMI、WC、WhtR的相关性

3．4 不同性别少年儿童血清肝酶与年龄、民族、BMI、WC、WhtR多元回归分析

4．讨论

4．1 体质表型维度与血清肝酶水平的一般情况

4．2 体质表型维度与血清肝酶水平的关系

5．小结

参考文献

附录 个人简历

致谢

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