类脂蛋白沉积症基因突变及致病机理研究

摘要

研究背景:
　　类脂蛋白沉积症(lipoid proteinosis，LP)是一种罕见的常染色体隐性遗传性皮肤病。由Urbach和Wiethe于1929年首次报道，又称为Urbach-Wiethe病或皮肤黏膜透明变性。目前本病的病因及沉积物性质仍未明确。临床上其主要表现为皮肤及黏膜不同程度的浸润、增厚及瘢痕形成，并可累及口腔黏膜、咽喉、神经系统及其他内脏器官。2002年Hamada首次报道本病是由人类1号染色体2区1带(1q21)的细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein1，ECM1)基因发生功能缺失突变引起。ECM1是调节表皮分化、真皮胶原和糖蛋白的结合和调节血管生成的关键蛋白。ECM1有10个外显子，目前总共发现有51种基因突变，突变多位于外显子6和外显子7。
　　研究目的:
　　选取类脂蛋白沉积症两个家系三名患者及两名散发患者进行ECM1基因突变相关研究，寻找ECM1基因外显子是否存在突变:如果有突变，是否为新发现的突变位点;如果没有突变，分析原因。
　　研究方法:
　　选取类脂蛋白沉积症家系中的两个家系三名患者及两名散发患者，采取其血液标本，提取血液中DNA。根据UCSC Genomes提供的ECM1基因全部外显子信息，为其全部外显子分别设计一对引物，PCR扩增全部外显子并进行直接测序，使用UCSC BLAT对测序结果进行分析比对，寻找突变位点。
　　研究结果:
　　用10对引物逐一扩增类脂蛋白沉积症一家系两名患者及其父母、一家系一名患者和两名散发患者的ECM1基因全部10个外显子序列，均得到预期长短的片段。对PCR产物直接测序，测序结果进行BLAT分析，发现一种已知突变（纯合突变p.C220G）和三个新的突变（纯合突变c.508insCTG、复合杂合突变p.C220G/p.R481X和c.507delT/c.1473delT)。
　　结论:
　　本研究发现一种已知突变和三种新的突变，这些突变均符合常染色体隐性遗传。

目录

英文缩略词表

摘要

前言

实验材料

一、患者临床资料

二、主要试剂

三、主要仪器耗材及来源

四、主要实验试剂的配制

实验方法

1．患者血液DNA的提取

2．PCR扩增

3．琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物

4．PCR产物直接测序

5．测序结果比对

实验结果

1．PCR扩增结果

2．DNA测序结果

讨论

结论

参考文献

综述 类脂蛋白沉积症研究进展

致谢

声明