天麻粉及天麻素治疗非酒精性脂肪性肝病的作用及机制研究

摘要

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种无过量饮酒史，以肝脏实质细胞脂肪变性及脂质沉积为特点的常见肝脏疾病。在我国，近年来NAFLD患者不断增多，但至今还没有发现安全有效的治疗NAFLD的特异性药物。天麻（Gastrodia elata Bl.），为兰科植物，其主要有效成分为天麻素(GSTD)，主要用于治疗神经系统疾病。本研究拟对天麻粉和GSTD改善NAFLD的作用和机制作出探索。
　　急性毒性实验中以天麻细粉片喂养动物14天后观察动物的死亡率和对天麻细粉片的最大耐受剂量(MTD);30天喂养实验检验天麻细粉片对动物体重、肝功能以及各器官的影响。在预防NAFLD的体内实验中以脂肪乳剂灌胃法建立NAFLD大鼠模型，同时给予天麻粉（4周）或GSTD（3周）。实验结束后检测大鼠血脂、肝重、肝功能、肝脏内三酰甘油(TG)水平和肝脏脂肪变性程度（H&E染色），并通过western-blot检测p-AMPKα水平。体外实验中利用油酸(OA)诱导构建HL-7702细胞脂肪变性模型，分别以油红染色和化学比色法检测细胞内脂肪和TG浓度，western blot检测p-AMPKα和p-ACC水平。
　　结果显示在安全性方面，天麻细粉片属于无毒级，其MTD＞15.0g/kg，并且对动物的体重、肝功能和各器官无明显影响。在预防NAFLD的体内药效方面，250mg/kg和525mg/kg的天麻粉可显著降低模型大鼠的肝重和血脂水平，改善肝功能，减少肝脏TG蓄积，改善肝脏脂肪变性程度;10mg/kg的GSTD能显著降低模型大鼠的肝重，减少肝脏TG蓄积，并激活肝脏AMPK通路。在体外，天麻粉水浸出物及GSTD可显著减少OA处理的HL-7702细胞脂肪蓄积、降低细胞内TG浓度，并且他们的作用依赖于细胞AMPK/ACC通路的激活。
　　本研究显示天麻粉及GSTD具有显著的预防NAFLD的作用，并且本研究首次发现他们的作用机制与激活肝细胞的AMPK/ACC通路相关。本研究将为天麻用于临床治疗NAFLD提供可靠的实验依据。

目录

摘要

引言

第一部分 天麻粉改善NAFLD的作用和机制研究

Abstract

第一节 天麻细粉片毒性与安全性实验

材料和方法

结果

小结

第二节 天麻粉改善NAFLD的动物实验

材料和方法

结果

小结

第三节 天麻粉水浸出物改善OA诱导的HL-7702细胞脂肪蓄积的体外实验

材料和方法

结果

小结

讨论

第二部分 天麻素改善NAFLD的作用和机制研究

Abstract

第一节 天麻素改善OA诱导的HL-7702细胞脂肪蓄积的体外实验

材料和方法

结果

小结

第二节 天麻素改善NAFLD的初步动物实验

材料和方法

结果

小结

讨论

参考文献

综述 肝脏脂肪代谢与NAFLD

附录

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