系统性硬化症患者血清和皮损中CCL20及其受体CCR6的表达及临床意义

摘要

目的:通过检测系统性硬化症(SSc)患者血清和皮损中CCL20及CCR6的表达，探索CCL20-CCR6轴在SSc发病中的作用，在进一步明确SSc发病机制的同时，对SSc的病情严重程度和预后评估起到辅助参考价值，并对可能的靶向治疗提供新思路。
　　方法:本课题采用病例-对照分组研究，其中病例组具体又分为弥漫性皮肤系统硬化症(dcSSc)组和局限性皮肤系统性硬化(lcSSc)组。收集2015年11月～2016年5月于北京协和医院皮肤科门诊确诊的43例SSc患者作为病例组，并将2016年3月～4月于北京协和医院体检中心查体的40例健康者作为对照组，病例组及对照组均留取2～4ml EDTA抗凝全血。首先，从人口统计学、临床表现及辅助检查三方面对临床资料进行描述和分析，初步评估纳入病例组患者的年龄性别分布、各个系统累及的程度和自身抗体的实验室检查情况。第二步，用ELISA方法检测病例组及对照组人群血清中CCL20和IL-17的浓度，并将dcSSc组、lcSSc组和对照组进行三组之间的两两比较，明确有无统计学差异，并以CCL20的浓度作为横坐标，IL-17的浓度作为纵坐标，分别绘制dcSSc组和lcSSc组两种细胞因子浓度的散点图，进行线性回归，分别分析dcSSc组和lcSSc组CCL20的表达水平是否与IL-17的表达存在相关性。最后，运用免疫组织化学染色的方法，对SSc患者的皮损和正常乳头皮肤组织进行CCR6的染色，比较CCR6在SSc患者皮损和正常皮肤组织中的表达差异，进一步明确CCL20-CCR6轴在SSc的发病机制中的意义。
　　结果:从人口统计学、临床表现和辅助检查三方面对收集的43例SSc病例进行了描述和统计。用ELISA方法检测病例组与对照组血清中CCL20的浓度，发现dcSSc组和lcSSc组血清中CCL20的表达水平均显著高于对照组(p＜0.01)，且lcSSc组CCL20的表达水平较dcSSc组更高(p＜0.05)，三组之间两两比较的差异均具有统计学意义。用ELISA方法检测病例组和对照组血清中IL-17的浓度，发现结果与CCL20的检测结果大致相同，dcSSc组和lcSSc组血清中IL-17的水平显著高于对照组(p＜0.01)，差异具有统计学意义，但dcSSc组与lcSSc组IL-17的表达未见明显差异。通过线性拟合的方法，我们发现在dcSSc组中，CCL20与IL-17的表达水平呈正相关，r=0.73，但在lcSSc组中，两种细胞因子之间未见明确相关性。最后，通过免疫组织化学染色我们验证了CCR6在SSc患者皮损中的表达，进一步明确了CCL20-CCR6轴在SSc的发病机制中的作用。
　　结论:CCL20可能通过与其受体CCR6结合，趋化炎症细胞迁移至皮肤组织，引起SSc的皮肤病理性改变。CCL20协同IL-17在dcSSc的发病中起到了致炎症作用。糖皮质激素可能通过抑制CCL20-CCR6轴的生理功能，在SSc中起到抗炎作用。血清中CCL20的表达水平或许可以作为SSc患者病情严重程度评估的辅助手段。

目录

摘要

前言

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法

三、统计学分析

实验结果

一、临床资料

二、血清中CCL20及IL-17表达水平的检测结果

三、CCR6免疫组织化学染色结果

讨论

一、SSc患者的临床资料统计分析

二、血清中CCL20及IL-17含量的检测

三、CCR6的免疫组织化学染色

结论

参考文献

附录

文献综述 趋化因子CCL20及其受体CCR6的研究进展

致谢

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