注射层次、混合注射及焦虑情绪对小鼠皮肤炎症反应的影响

摘要

注射美容的越发流行伴随着与之相伴的并发症的增加，而异物肉芽肿形成是晚期严重并发症之一。临床实践及实验研究中发现，注射层次过浅及短期内多次注射与异物肉芽肿的形成有一定关系。焦虑是现代人经常存在的一种情绪，精神皮肤疾病也非常常见，精神和心理状态与皮肤疾病的发生有着非常密切的关系。
　　研究目的：探索注射层次、混合注射以及焦虑情绪对小鼠皮下注射后组织炎症反应的影响。
　　注射材料：透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)，聚甲基丙烯酸甲酯(Poly Methy-Methacrylate，PMMA)
　　研究方法：将24只小鼠随机分为4组，每组6只。1）注射方法及观察时间：其中三组每组均于小鼠头部骨膜上、左背部皮下注射0.1ml PMMA，右背部皮下注射0.1ml混合材料(HA+PMMA);分别于注射后第一周、第六周、第十二周获取小鼠注射部位皮肤及皮下注射材料。第四组用于构建焦虑应激模型，于左背部皮下注射0.1ml PMMA，于注射后第六周获取小鼠注射部位皮肤及皮下注射材料。2）焦虑模型的建立：联合采用不确定空瓶饮水刺激和单笼饲养建立应激模型：在每天的8：30-8：50和16：30-16：50的两个时间段内各给小鼠饮水20分钟，其余时间撤去水瓶不给水，自由摄食，一共14天;从第15天开始，随机选择上述两个时间段内一个饮水时间点给予空瓶刺激，持续14天;从第29天开始，单只单笼饲养，同时继续空瓶刺激，持续14天。3）结果观察：对获取的组织进行HE染色、Masson染色，使用炎性反应半定量评分量表对注射部位炎症反应进行评分;进行CD3和CD68免疫组化，半定量分析淋巴细胞和巨噬细胞的变化趋势。
　　研究结果：1）骨膜上注射后第一周、第六周、第十二周炎性浸润在不同时间段互相比较评分差异具有统计学意义(p＜0.05)，皮下注射和混合注射在不同时间段炎性浸润评分无差异。注射后第一周注射材料内炎性浸润评分少于注射材料外包裹区域评分(p＜0.05)。2)骨膜上注射后第一周炎性细胞和炎性浸润评分均低于皮下注射(均p＜0.05)，第六周和第十二周无明显差异。骨膜上注射后第一周和第十二周CD3阳性细胞的表达均高于皮下注射(p＜0.05)。3)混合注射后第一周、第六周、第十二周炎性浸润评分较单纯PMMA注射均无明显差异。4）焦虑组小鼠进入高架十字迷宫开臂的次数百分比(OE％)和时问百分比(OT％)均小于对照组小鼠(p＜0.05)。焦虑组小鼠注射部位炎性浸润评分高于对照组小鼠(p＜0.05)，CD3阳性细胞表达较对照组增加(p＜0.05)，CD68表达较对照组减少(p＜0.05)。
　　研究结论：1）骨膜上注射能减少注射早期炎症反应，可能加快注射后炎症消退速度。2)透明质酸混合PMMA注射较单纯PMMA注射不增加局部炎症浸润程度。3）焦虑样情绪会增加小鼠注射后局部炎症反应。

目录

摘要

引言

Part 1 实验材料与主要技术

1．1 实验动物及来源

1．2 动物福利与伦理

1．3 实验仪器及耗材

1．4 实验试剂

1．5 实验技术及方法

1．6 数据统计及分析

Part 2 实验方案

2．1 实验分组与设计

2．2 焦虑应激模型的建立

2．3 高架十字迷宫行为学检测

2．4 实验结果评分及半定量分析

Part 3 实验结果

3．1 组织获取及染色观察

3．2 不同时间段组织炎症反应变化

3．2．1 皮下注射PMMA

3．2．2 骨膜上注射PMMA

3．2．3 皮下注射HA+PMMA

3．2．4 材料内外炎性细胞评分

3．3 注射层次对组织炎症反应的影响

3．3．1 炎性浸润评分

3．3．2 免疫组化结果

3．4 注射材料对组织炎症反应的影响

3．4．1 炎性浸润评分

3．4．2 免疫组化结果

3．5 焦虑情绪对组织炎症反应的影响

3．5．2 炎性浸润评分

3．5．3 免疫组化结果

Part 4 实验讨论

4．1 不同时间段组织炎症反应观察结果

4．2 注射层次对组织炎症反应的影响

4．3 注射材料对组织炎症反应的影响

4．4 焦虑情绪对组织炎症反应的影响

Part 5 实验结论

参考文献

中英文缩略词表

综述 注射美容填充剂相关异物肉芽肿

致谢

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