黑茶提取物辐射防护和脓毒症治疗作用及其机制研究

摘要

黑茶，六大茶类之一，属于后发酵茶。近年来随着对黑茶研究的不断深入，发现黑茶中的主要活性成分有：茶多糖、茶多酚、茶褐素和生物碱等。现代药理学和分子生物学实验已经证明，黑茶的主要药理活性有减肥、降血脂、降胆固醇、抗氧化、抑菌、抗肿瘤等，而对黑茶的辐射防护作用和脓毒症的治疗作用方面鲜有报道。
　　本论文实验主要分三部分研究黑茶对辐射损伤防护作用和脓毒症的治疗作用：
　　第一章为黑茶有效成分的初步提取分离：以湖南安化黑茶为原料，采用80℃热水提取，然后用多种有机溶剂萃取，分别得黑茶水提物，茶多糖及脂溶性物质等。
　　第二章为黑茶提取物辐射防护作用：以黑茶各提取物为研究对象，通过动物实验和细胞实验探究黑茶的辐射防护作用及其作用机制。动物实验是：黑茶提取物对辐射损伤小鼠造血系统和免疫系统的防护作用实验、黑茶对辐射损伤小鼠整体防护作用实验和黑茶对辐射致小鼠氧化损伤的防护作用实验，研究黑茶提取物的辐射防护作用。细胞实验是探究不同浓度的黑茶提取物对HEK-BlueTM TLR5细胞中toll样受体5(Toll-like5receptors，TLR5)的激活作用，研究黑茶辐射防护作用的机制。
　　第三章为黑茶提取物对脓毒症的治疗作用：该实验研究了黑茶提取物对脓毒症的治疗作用，分别采用腹腔注射40mg/kg的脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）和盲肠结扎穿孔手术（cecal ligation plus puncture，CLP）建立脓毒症模型，研究黑茶提取物对脓毒症小鼠7d存活率的影响;细胞实验是探究不同浓度的黑提取物对10μg/ml LPS诱导的巨噬细胞程序性坏死的影响，进一步探究黑茶提取物对脓毒症治疗作用的机制。
　　以上药理实验结果显示，黑茶水提物可提高辐射损伤小鼠白细胞数、股骨有核细胞数、骨髓DNA含量和脾结节数，对辐射损伤小鼠造血系统和免疫系统有较好的保护作用。黑茶水提物可提高受到致死剂量照射小鼠的平均存活时间和30d存活率，表现出较好的整体辐射防护作用。黑茶水提物也可提高辐射损伤小鼠肝组织和肺组织中总超氧化物歧化酶(Total Superoxide dismutase，T-SOD)、过氧化氢酶(Catalase，CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase，GSH-Px)的活性，降低丙二醛(Malondialdehyde，MDA)的含量，表现出较好的抗氧化活性。细胞实验表明黑茶多糖可激活TLR5受体，这可能是黑茶辐射防护作用的机制之一。另外，黑茶水提物对脓毒症的治疗作用实验表明，黑茶水提物可提高脓毒症小鼠7d的存活率，延长其平均存活时间。细胞实验表明，黑茶多糖对LPS（10μg/ml）诱导的巨噬细胞程序性坏死有一定的抑制作用，此可能是黑茶提取物对脓毒症治疗作用的机制之一。
　　综上，黑茶水提物有一定的辐射防护作用，其作用的机制可能与其抗氧化活性、激活TLR5受体有关;黑茶水提取对40mg/kg LPS诱导和CLP致脓毒症的小鼠模型有一定的治疗作用，可能与黑茶多糖对10μg/ml LPS诱导的巨噬细胞程序性坏死抑制作用有关。它们具体的作用机制有待进一步研究。

目录

摘要

前言

第一章 黑茶有效成分的提取分离

1．实验材料

2．试验方法

3．提取工艺流程

4 实验结果

第二章 黑茶提取物辐射防护作用

1 实验材料

2 实验内容

1．实验材料

2 实验方法

第三章 黑茶提取物对脓毒症的治疗作用

第一节 动物实验部分

1、LPS诱导小鼠脓毒症模型

2 盲肠结扎穿孔术致脓毒症模型

3 实验讨论

第二节 细胞实验部分

2．1 溶液配制

2．2 实验动物

2．3 实验方法

2．4 实验结果

2．5 实验讨论

第四章 总结

参考文献

黑茶的药理作用研究进展

缩略词表

硕士在读期间发表的论文

致谢

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