耐力训练诱导AMPK对小鼠骨骼肌PP38-磷酸化MEF2影响

摘要

研究发现AMPK可以激活GLUT4的表达，但是AMPK调节GLUT4表达的具体机制尚不清楚。多项研究表明MEF2是GLUT4转录过程的必需因子。MAPK亚家族成员—p38MAPK可通过磷酸化途径活化MEF2，增强其转录活性。同时AMPK可以激活下游的p38转化为pp38。
　　研究目的：本文以AMPKα2转基因小鼠，AMPKα2基因敲除小鼠和野生小鼠为研究对象，探讨耐力训练诱导AMPK对骨骼肌p38、pp38及核内p-MEF2A蛋白表达的影响。
　　研究方法：C57BL/6J野生鼠、AMPKα2转基因和AMPKα2基因敲除小鼠各20只，每种小鼠按体重随机分为安静对照组和耐力训练组，每组10只。对照组小鼠不施加运动负荷，安静状态下笼养，耐力训练组小鼠训练方案设计为0坡度跑台运动，速度为12m/min，每天训练一个小时，每周六天，持续四周。训练组小鼠最后一次训练结束后12小时颈椎脱臼法处死，取双侧股四头肌肉。应用Western blot法测定p38、pp38和核内p-MEF2A蛋白表达。
　　研究结果：1)与安静对照组相比，四周耐力训练后AMPKα2三种不同基因型小鼠骨骼肌pp38蛋白表达均显著提高,并且AMPKα2转基因鼠与野生鼠相比，p38和pp38蛋白表达增加显著,AMPKα2基因敲除鼠pp38蛋白表达虽然低于野生鼠，但没有显著性差异；2)与安静对照相比，AMPKα2三种基因型鼠骨骼肌核内p-MEF2A蛋白表达均显著增加，并且AMPKα2转基因鼠与野生鼠相比，p-MEF2A蛋白表达显著增加，而AMPKα2基因敲除小鼠p-MEF2A与野生鼠相比没有显著差异；3）42只小鼠骨骼肌内pp38与细胞核内p-MEF2A表达含量呈显著正相关（R=0.69，P﹤0.05）。
　　研究结论：耐力训练对AMPKα2三种不同基因型小鼠骨骼肌内p38蛋白表达影响不大，但可以显著促进p38和MEF2A的激活。AMPKα2可能不是唯一激活p38和MEF2A的途径。pp38与MEF2A磷酸化促进MEF2转录活性密切相关。

目录

中文摘要

英文摘要

目录

1 前言

2 文献综述

2.1 MEF2的概述

2.2 p38的概述

2.3 AMPK的概述

3 研究对象和方法

3.1 实验对象

3.2 实验方案设计

3.3 实验用试剂和仪器

3.4 总蛋白表达的测定方法

3.5数据统计

4 实验结果

4.1耐力训练对AMPKα2三种基因型小鼠骨骼肌p38蛋白表达的影响

4.2耐力训练对AMPKα2三种基因型小鼠骨骼肌pp38蛋白表达的影响

4.3耐力训练对AMPKα2三种基因型小鼠骨骼肌细胞核内P-MEF2蛋白表达的影响

4.4耐力训练前后AMPKα2三种基因型小鼠骨骼肌pp38与核内p-MEF2A蛋白表达的相关性分析

5 分析与讨论

5.1耐力训练对AMPKα2三种基因型小鼠骨骼肌内p38和pp38蛋白表达的影响

5.2耐力训练对AMPKα2三种基因型小鼠骨骼肌细胞核内P-MEF2A蛋白表达的影响

5.3耐力训练前后AMPKα2三种基因型小鼠骨骼肌pp38与核内P-MEF2A蛋白表达的相关性分析

6 结论

致谢

参考文献

附录英文缩略词

个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果