Omi在离心运动诱导骨骼肌细胞凋亡及针刺干预中的作用

摘要

目的：
　　观察离心运动对骨骼肌细胞凋亡和线粒体的影响，分析丝氨酸蛋白酶（Omi）在离心运动后骨骼肌细胞凋亡中的作用机制，探究针刺干预对骨骼肌细胞凋亡的作用。
　　方法：
　　研究一和研究二将大鼠分为安静对照、离心运动、单纯针刺和运动针刺四大组，研究三将大鼠分为安静对照、离心运动、单纯阻断、DMSO和运动阻断五大组。使用荧光酶联免疫吸附法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase-3，-8，-9，-12）的活性；透射电镜观察线粒体超微结构；荧光染色检测线粒体膜通透性转换孔（MPTP）的开放情况；Western Blot和Realtime-PCR法分别检测Omi、凋亡抑制蛋白（XIAP）的蛋白表达和基因水平；Co-IP法检测XIAP和Omi的相互结合作用。
　　结果：
　　（1）离心运动后Caspase-3，-8，-9，-12活性均一过性升高，而针刺能显著降低运动后Caspase-3，-8，-9，-12活性。离心运动后线粒体分布和形态出现典型的病理学改变，而针刺能促进其恢复。离心运动能使MPTP开放增加，而针刺能减小运动后MPTP开放程度。
　　（2）离心运动后Omi、XIAP的蛋白表达和mRNA水平均呈一过性升高，针刺能明显下调运动后Omi的表达，上调运动后XIAP的表达。离心运动和针刺干预均能促进XIAP和Omi相互结合。
　　（3）Omi的特异性抑制剂 Ucf-101能明显降低运动后Caspase-3，-9活性，对运动后Caspase-8，-12活性没有影响。Ucf-101能下调运动后Omi的蛋白表达，上调运动后XIAP的蛋白表达。
　　结论：
　　（1）离心运动可以引起骨骼肌细胞凋亡，这种凋亡可能有Caspase-8、Caspase-9和Caspase-12依赖的凋亡途径同时参与。而针刺干预能通过抑制这三条途径来减少细胞凋亡的发生。离心运动可以导致骨骼肌线粒体结构损伤，MPTP高通透性开放，而针刺能促进其恢复。
　　（2）离心运动可能通过上调Omi的表达，促进XIAP与Omi相互结合，进而激活Caspase-9和Caspase-3的活性，促使细胞凋亡的发生。而针刺可以通过抑制该途径来减少骨骼肌细胞凋亡的发生。
　　（3）Omi的特异性抑制剂Ucf-101可以通过抑制Omi的蛋白表达，促进XIAP的蛋白表达，减轻依赖Caspase-9介导的线粒体途径来减少骨骼肌细胞凋亡的发生。

目录

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目录

中英文缩略词对照表

1 前言

1.1 概述

1.2 实验内容

1.3 实验假设

1.4 研究技术路线

2 文献综述 运动对骨骼肌细胞凋亡影响的研究进展

2.1 细胞凋亡

2.2 运动对骨骼肌细胞凋亡的影响

2.3 线粒体促凋亡蛋白Omi

2.4 凋亡抑制蛋白XIAP

3 研究一 一次离心运动后不同时程大鼠骨骼肌细胞凋亡和线粒体变化及针刺干预作用

3.1 前言

3.2 材料与方法

3.3 结果

3.4 分析与讨论

3.5 小结

4 研究二 Omi在离心运动诱导大鼠骨骼肌细胞凋亡中的变化及针刺干预作用

4.1 前言

4.2 材料与方法

4.3 结果

4.4 分析与讨论

4.5 小结

5 研究三 Omi的抑制剂Ucf-101对离心运动后大鼠骨骼肌细胞凋亡的作用

5.1 前言

5.2 材料与方法

5.3 结果

5.4 分析与讨论

5.5 小结

6 结论

致谢

参考文献

个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果