昆虫细胞的建库技术研究及昆虫细胞的原代培养

摘要

该研究是针对目前中国只有20余株昆虫细胞系的状况,通过自建和收集国内外的昆虫细胞系,建立中国的第一个专业昆虫细胞库,为中国的生物技术、分子生物学、生化和遗传研究提供必要的技术和物质储备.该研究利用多种昆虫的不同组织进行了昆虫细胞体外培养的尝试,为建立新的昆虫细胞系提供了必要的理论基础和有益的借鉴.并对昆虫细胞建库技术作了初步的研究,从而为昆虫细胞研究提供了重要的理论依据.1、细胞建库技术的初步研究.该实验除了测定所保存的7株细胞系的生长特性和形态特征外,还采用对比方法,即分别选用超低温冰箱和液氮罐并选用二甲亚砜和甘油为保护剂,冻存了7株引进细胞系.实验中分别对七株细胞进行了冷冻保存和复苏的实验对比,探讨总结了昆虫细胞建库中保存细胞需要注意的一些问题,为建立细胞系库充实了必要的参考数据,并且为昆虫细胞系库的建立技术研究奠定了一定的基础.2.昆虫细胞的原代培养.该研究通过对不同虫种、不同组织的细胞进行体外原代培养的尝试,在一些虫种上取得了较好的进展,总结了在昆虫细胞原代培养过程中关于虫体组织的选取和处理以及细胞传代过程中需要注意的一些问题,为下一步新昆虫细胞系的建立提供了有益的经验借鉴.

目录

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1引言

2昆虫细胞培养研究综述

2.1昆虫细胞培养基的研究

2.2昆虫细胞系的建立

2.3昆虫细胞培养过程中微生物的污染

2.3.1污染的检测

2.3.2污染的排除

2.4昆虫细胞的冻存与复苏

2.4.1冷冻保存方法

2.4.2冻存昆虫细胞的复苏

2.5昆虫细胞—杆状病毒表达系统(BEVS)

2.5.1 BEVS的特点

2.5.2昆虫细胞的大规模培养

3昆虫细胞建库技术的初步研究

3.1材料

3.2建立昆虫细胞库所用的设备和器具

3.2.1培养基配制所需的设备和器具

3.2.2体外培养的设备和器具

3.2.3玻璃器皿的清洗与消毒

3.3方法

3.3.1 MM培养基的配制

3.3.2 MGM-450昆虫细胞培养基的配制

3.3.3细胞生长特征的研究方法

3.3.4细胞形态特征的研究方法

3.3.5细胞的冻存与复苏

3.4结果与讨论

3.4.1实验结果3.4.1.1细胞系的生长特征与形态特征(1-4)

3.4.1实验结果3.4.1.1细胞系的生长特征与形态特征(5-7)

3.4.1实验结果4.4.1.2细胞冻存结果

3.4.2讨论

3.5小结

4昆虫细胞的原代培养

4.1思茅松毛虫细胞的原代培养

4.1.1材料

4.1.2方法

4.1.3结果与讨论

4.2云南琵琶甲血淋巴细胞的原代培养

4.2.1材料

4.2.2方法

4.2.3结果与讨论

4.3白带锯蛱蝶细胞的原代培养

4.3.1材料

4.3.2方法

4.3.3结果与讨论

4.4小结

4.4.1关于虫体组织处理的建议

4.4.2关于细胞传代的建议

参考文献

致谢

附录