三种相思开放式组培快繁及扦插生根技术研究

摘要

本文对马占相思、大叶相思和马大杂种相思的开放式组织培养以及扦插生根进行了系统的研究，主要研究内容包括:三种相思开放组培芽诱导培养、开放组培生根培养、开放组培继代生根培养实现增殖，以及简化的扦插生根。成功建立了三种相思开放式芽诱导途径，以及开放式生根，继代生根途径的组培技术，为相思良种快速繁殖工厂化提供技术支撑和保障。利于简化组培技术，降低组培成本，提高组培效率，丰富了开放组培的理论研究，为林木良种无性快繁提供理论和技术支持，推进林木育种工作及良种推广应用。同时，建立的三种相思简化的扦插生根技术，对今后深入、准确地开展扦插生根机理研究具有十分重要的意义。主要研究结果如下: (1)三种相思开放式组培及扦插生根适宜的抑菌剂种类和浓度均一致:以百菌清0.2g·L-1最为适宜，三种相思对应的最低污染率分别为马占相思6.94％，大叶相思5.56％，马大杂种相思6.95％。表明三种相思开放培养时，低浓度百菌清即可将污染率控制在较低水平。 (2)三种相思开放式组培及扦插生根适宜的外植体类型和消毒方式均一致:剪取中部（第3-5腋芽茎段）带叶茎段，以0.8g·L-1多菌灵浸泡3min进行消毒最适宜，对应的存活率分别为:马占相思90.48％，大叶相思100.00％，马大杂种相思100.00％。以多菌灵浸泡的方式对外植体进行消毒，对外植体的伤害较小，能在保证低污染率的同时，提高存活率。 (3)10月采集外植体进行开放式组培芽诱导，三种相思的芽诱导率最高且诱导率一致:三种相思最适芽诱导培养基，马占相思:琼脂7.0g·L-1+百菌清0.2g·L-1+6-BA0.5mg·L-1，大叶相思:1/8MS+琼脂7.0g·L-1+百菌清0.2g·L-1+6-BA1.5mg·L-1，马大杂种相思:1/8MS+琼脂7.0g·L-1+百菌清0.2g·L-1+6-BA0.5mg·L-1;最高出芽率均为99.54％。马占相思和马大杂种相思对6-BA的需求量相同，大叶相思则表现高的6-BA需求量。 (4)三种相思开放组培生根率，马大杂种相思＞大叶相思＞马占相思。最适开放生根培养基及生根率，马占相思:琼脂7.0g·L-1+百菌清0.2g·L-1+NAA0.5mg·L-1+IBA1.25mg·L-1，生根率68.75％;大叶相思:琼脂7.0g·L-1+百菌清0.2g·L-1+IBA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1，生根率88.25％;马大杂种相思:琼脂7.0g·L-1+百菌清0.2g·L-1+IBA1.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1，生根率97.62％。马占相思开放生根率最低，马大杂种相思在生根培养中则显现出了杂种优势。 (5)三种相思，以开放组培继代生根方式可实现增殖，随着继代生根培养次数增加增殖倍数不断上升，4次开放组培继代生根的增殖倍数分别为，马占相思2.29，大叶相思3.25，马大杂种相思3.58。 (6)三种相思简化的扦插生根培养的生根率均较高:马占相思插条基部用IBA0.6g·L-1处理2h，大叶相思插条用IBA0.8g·L-1处理3h，马大杂种相思插条用IBA1.0g·L-1处理2h时，均扦插于基质（琼脂7.0g·L-1+百菌清0.2g·L-1）中，在组培室内进行简化的扦插生根培养，三种相思简化扦插生根率分别为94.33％，100％，100％。以扦插生根能实现三种相思的瓶内生根，在扦插基质简化的同时获得高生根率。

目录

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摘要

图目录

表目录

第一章绪论

1．1．1研究背景

1．1．2研究的目的和意义

1．1．3项目来源与经费支持

1．2国内外研究现状

1．2．1传统组培存在的主要问题

1．2．2开放式组培研究进展及存在的问题

1．2．3林木扦插培养研究进展及存在的主要问题

1．3研究目标和主要研究内容

1．3．1研究目标

1．3．2主要研究内容

1．3．3研究技术路线

第二章马占相思开放式组培快繁及扦插生根

2．1材料

2．2方法

2．2．1开放式芽诱导培养

2．2．2开放式组培生根

2．2．3多次开放式组培生根实现增殖

2．2．4扦插生根

2．2．5培养条件

2．2．6数据处理

2．3结果与分析

2．3．1开放式芽诱导培养

2．3．2开放式组培生根

2．3．3多次开放式组培生根实现增殖

2．3．4扦插生根

第三章大叶相思开放式组培快繁及扦插生根

3．1材料

3．2方法

3．2．1开放式芽诱导培养

3．2．2开放式组培生根

3．2．3多次开放式组培生根实现增殖

3．2．4扦插生根

3．2．5培养条件

3．2．6数据处理

3．3结果与分析

3．3．1开放式芽诱导培养

3．3．2开放式组培生根

3．3．3多次开放式组培生根实现增殖

3．3．4扦插生根

第四章马大杂种相思开放式组培快繁及扦插生根

4．1材料

4．2方法

4．2．1开放式芽诱导培养

4．2．2开放式组培生根

4．2．3多次开放式组培生根实现增殖

4．2．4扦插生根

4．2．5培养条件

4．2．6数据处理

4．3结果与分析

4．3．1开放式芽诱导培养

4．3．2开放式组培生根

4．3．3多次开放式组培生根实现增殖

4．3．4扦插生根

5．1结论

5．1．1三种相思开放式组培快繁

5．1．2三种相思扦插生根

5．1．3本研究存在的不足

5．2讨论

5．2．1三种相思开放式培养的抑菌体系

5．2．2三种相思开放式组培快繁

5．2．3三种相思扦插生根

5．3展望

参考文献

附录

在读期间的学术研究

致谢