麻花秦艽化学成分、生物活性及环烯醚萜含量测定的研究

摘要

麻花秦艽为龙胆科龙胆属植物，其根具有祛风湿，清湿热，止痹痛的功效；用于风湿痹痛，筋脉拘挛，骨节酸痛，日晡潮热，小儿疳积发热。其化学成分较复杂，生物活性多样，未进行系统深入的研究。
　　 本文利用液-液萃取、硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、ODS柱色谱、Sepdehax-LH20柱色谱等分离手段，从麻花秦艽的根中分离得到23个化合物，通过理化性质和波谱方法鉴定了22个化合物，分别为：7(S)-n-butyl morroniside(1)、7(R)-n-butyl morroniside(2)、6'-O-acetyl gentiopicroside(3)、6'-O-(2-hydroxy-3-O-β-D-glucopyranosyl-benzoyl)-sweroside(4)、gentiopicroside(5)、swertiamarin(6)、sweroside(7)、logannic acid(8)、6'-O-β-D-glucosylgentiopicroside(9)、2'-O-(2，3-dihydroxyl-benzoyl)-sweroside(10)、macrophyiioside D(11)、(-)-syringaresinol-4,4'-bis-β-O-D-glucopyranoside(12)、gentiaphyllide-D(13)、gentiaphyllide-E(14)、erythrecentaurin(15)、roburic acid(16)、uvaol(17)、daucosterol(18)、β-sitosterol(19)、gentianose(20)、β-glucose(21)和α-glucose(22)；其中化合物1、3和4是新化合物；化合物2为首次由龙胆属植物分离得到的化合物；化合物6、7、8、9、11、12、13、14、15、16和20为首次由麻花秦艽中分离得到的化合物。
　　 在生物活性方面，本文对由麻花秦艽中分离得到的5种裂环环烯醚萜(4，5，6，7，9)进行了与抗炎和抗氧化作用相关的生物活性的研究，并初步探讨了它们的构效关系。实验表明，5个环烯醚萜化合物均对N-甲酰蛋氨亮氨酰苯丙氨酸(fMLP)诱导的人中性粒细胞自由基的产生显示浓度依赖性抑制作用，其中化合物9的作用最强。化合物4和5对花生四烯酸(AA)和佛波醇-12-十四烷酸酯-13-乙酸酯(PMA)诱导的人中性粒细胞自由基的产生显示浓度依赖性抑制作用，其中4的抑制作用强于5；化合物6、7和9不显示明显的抑制作用。5个环烯醚萜化合物均对红细胞的脂质过氧化无明显的保护作用。测试了5个环烯醚萜化合物的溶血作用，发现在明显高于显示抑制活性的浓度下不发生溶血作用。动物实验方面，研究了化合物4和5对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响，两种化合物对二甲苯所致小鼠耳肿胀均有抑制作用，化合物4的抑制活性强于化合物5。
　　 本文还建立了HPLC-UV/MS法对秦艽中环烯醚萜化合物(1-10)的含量进行了测定。色谱柱为Kromasil-C18柱；流动相为体积分数为0.04％磷酸的水(A)和甲醇(B)，0-10 min内10-20％的B线性梯度洗脱，10-20 min内20％的B等梯度洗脱，20-65 min内20-75的B线性梯度洗脱；流速为1 mL/min；柱温为25℃；检测波长为254 nm；质谱检测时流动相以甲酸替换磷酸。该方法具有良好的线性关系和回收率，可以为秦艽的质量控制和开发提供科学依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 绪论

1.1绪言

1.2植物形态

第二章 秦艽的研究概况

2.1秦艽的化学成分研究现状

2.2秦艽的药理作用

2.2.1抗炎作用

2.2.2保肝护胆作用

2.2.3抗菌作用

2.2.4中枢神经作用

2.2.5其它作用

第三章 麻花秦艽的化学成分研究

3.1化合物的提取与分离

3.2化合物的鉴定

3.2.1新化合物的鉴定

3.2.2已知化合物的鉴定

3.3结果与讨论

第四章 秦艽环烯醚萜类化合物的生物活性研究

4.1化合物对人中性粒细胞自由基产生作用的影响

4.1.1中性粒细胞NADPH氧化酶简介

4.1.2实验步骤

4.1.3结果与讨论

4.2化合物对红细胞膜脂质过氧化的保护作用的研究

4.2.1脂质过氧化简介

4.2.2实验步骤

4.2.3实验结果

4.3化合物的溶血试验

4.4对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

4.5小结

第五章 秦艽的质量控制研究

5.1测定方法的建立

5.1.1 HPLC和HPLC-MS的条件

5.1.2标准曲线的制作

5.1.3精密度试验

5.1.4重复性和稳定性试验

5.1.5加样回收试验

5.1.6检出限和定量限的确定

5.2样品的测定

5.2.1样品的制备

6.2.2样品的测定

5.3讨论和结论

5.3.1色谱条件的优化

5.3.2化合物的鉴定

5.3.3分析方法的验证

5.3.4样品分析

5.3.5结论

第六章 实验部分

6.1实验仪器与材料

6.2麻花秦艽中化学成分的提取与分离

6.3麻花秦艽中化学成分的鉴定数据

小结与讨论

参考文献

附图

致谢

研究成果及发表的学术论文

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