新型磁纳米载体在生物酶和人工金属酶中的构建及应用

目录

声明

摘要

符号说明

第一章绪论

1．1引言

1．2．1 HpaBC简介

1．2．2 HpaBC的具体应用

1．3人工金属酶

1．3．1人工金属酶的简介

1．3．2生物素-链霉亲和素技术应用于人工金属酶

1．3．3人工金属酶的研究进展

1．4酶的固定化

1．4．1固定化酶的简介

1．4．2酶固定化的载体材料

1．5本课题的研究意义及主要内容

1．5．2本课题研究的主要内容

第二章Ni-NTA功能化的磁性纳米载体在生物酶固定化中的应用

2．1实验材料和仪器

2．1．1实验材料

2．1．2实验仪器

2．2实验方法

2．2．2 His-tagged HpaB、His-tagged HpaC的构建与表达

2．2．3载体与His-tagged HpaB、His-tagged HpaC的固定化

2．2．4激光共聚焦表征实验

2．2．5 Ni-NTA／Fe3O4@SiO2-NH2对His-tagged HpaB／HpaC的特异性吸附研究

2．2．7固定化条件的优化

2．2．8稳定性实验

2．3结果与讨论

2．3．1磁性纳米载体的表征

2．3．2 His-tagged HpaB和His-tagged HpaC的表达

2．3．3激光共聚焦表征

2．3．4 Ni-NTA／Fe3O4@SiO2-NH2对His-tagged HpaB／HpaC的特异性吸附研究

2．3．5固定化条件的优化

2．3．6稳定性实验

2．4本章小结

第三章生物素功能化的磁性二氧化硅纳米载体在铱负载的人工金属酶中的构建及应用

3．1实验材料和仪器

3．1．1实验材料

3．1．2实验仪器

3．2实验方法

3．2．1链霉亲和素(SAV)的构建与表达

3．2．2生物素化铱复合物(CP*Ir)的制备及表征

3．2．3人工金属酶的制备及活性检测

3．2．4 Fe3O4@SiO2-NH2-biotin-SAV-CP*Ir的制备及裹征

3．2．5溶液中蛋白含量的测定与固定率的计算

3．2．6生物素功能化的的磁性载体与SAV租蛋白液的固定化条件研究

3．2．8稳定性研究

3．2．9人工金属酶与生物酶联用活性检测

3．3结果与讨论

3．3．1链霉亲和素的表达

3．3．2生物素化铱复合物(CP*Ir)的表征

3．3．3 Fe3O4@SiO2-NH2-biotin-SAV-CP*Ir的表征

3．3．4生物素功能化的磁性载体与SAV粗蛋白液的固定化条件研究

3．3．5稳定性实验

3．3．6人工金属酶与生物酶联用活性检测

3．4本章小结

第四章磁性二氧化硅纳米载体在钒负载的人工金属酶中的构建及应用

4．1实验材料和仪器

4．1．1实验材料

4．1．2实验仪器

4．2实验方法

4．2．1链霉亲和素的构建与表达

4．2．2钒负载的人工金属酶的配位及催化活性研究

4．2．4研究不同浓度的的咪唑溶液对钒负载的人工金属酶催化反应的影响

4．2．5钒负载的人工金属酶的固定化

4．2．6稳定性研究

4．3结果与讨论

4．3．1钒负载的人工金属酶的配位及催化活性研究

4．3．2链霉亲和素与VOSO4的比例

4．3．3不同浓度的的咪唑溶液对钒负载的人工金属酶催化反应的影响

4．3．4固定化后人工金属酶的稳定性研究

4．4本章小结

第五章结论

参考文献

致谢

作者及导师简介