2017--2020年浙江省部分地区猫泛白细胞减少症病毒分子特征与VP2表达及应用初探

目录

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摘要

符号说明

1．1前言

1．2FPV的流行情况

1．3FPV的病原学

1．3．1FPV基因组及编码蛋白

1．3．2形态特征和生物学特性

1．4临床症状和病理变化

1．5诊断

1．5．1电镜观察

1．5．2病毒分离鉴定

1．5．2血清学检测

1．5．3分子生物学诊断

1．6防制

1．6．1疫苗预防

1．6．2血清治疗法

1．6．3单克隆抗体治疗法

1．6．4基因工程抗体治疗法

1．6．5中西医结合治疗法

1．7本研究的目的和意义

第2章20株FPV的分离鉴定及VP2基因序列分析

2．1材料

2．1．1生物材料

2．1．2主要试剂

2．1．3主要仪器

2．2方法

2．2．1病料处理

2．2．2病毒DNA的提取

2．2．3PCR鉴定

2．2．4病毒分离

2．2．5VP2基因扩增

2．2．6全基因组扩增

2．2．7病毒电镜观察

2．2．8VP2序列分析

2．2．9全基因组序列分析

2．3结果与分析

2．3．1PCR鉴定结果

2．3．2病毒分离结果

2．3．3电镜观察结果

2．3．4VP2序列分析

2．3．5全基因组序列分析

2．4讨论

第3章FPV VP2基因的原核、真核表达及鉴定

3．1材料

3．1．1生物材料

3．1．2主要试剂

3．1．3主要仪器

3．2方法

3．2．1引物设计

3．2．2目的基因的获取

3．2．3VP2的原核表达载体的构建、表达及鉴定

3．2．4VP2的真核表达载体的构建、表达及鉴定

3．3结果与分析

3．3．1目的基因克隆

3．3．2重组质粒的酶切鉴定

3．3．3重组VP2蛋白的SDS-PAGE鉴定

3．3．4重组VP2蛋白的WB鉴定

3．3．5VP2间接ELISA方法的初步建立

3．3．6间接免疫荧光分析VP2蛋白在FK81细胞中的表达

3．3．7小鼠体内抗体检测结果

3．4讨论

全文结论

参考文献

致谢