颅内药物支架的构建及其促内皮化作用的研究

摘要

背景和目的目前神经外科介入手术用于治疗颅内动脉瘤的支架均为裸支架，无法很好的促进载瘤动脉瘤颈部的内皮化，导致应用支架治疗后动脉瘤的复发率仍高于10%以上。因此如何使支架更具有促进动脉瘤颈部的的内皮修复能力，是提高动脉瘤的闭塞率及降低动脉瘤血管内介入治疗复发率的关键。我们构思在裸支架上加载有助于促进内皮化的VEGF(血管内皮生长因子)和能有效粘附内皮祖细胞的抗CD34抗体，使之具有更佳促进载瘤动脉血管内皮生长的作用。方法首先，我们先用与Enterprise支架相同材质的镍钛合金片模拟药物洗脱支架的构建。利用多巴胺的自聚合反应及类贻贝蛋白强粘附力的特性，在镍钛合金平片上固定一层聚多巴胺层，然后利用共价结合和原位还原反应在多巴胺层表面固定肝素、血管内皮生长因子和抗CD34抗体。通过cy3标记的链霉亲和素、人VEGFElisa试剂盒实验和人IgGElisa试剂盒实验验证血管内皮生长因子(VEGF)及抗CD34抗体成功加载后，再进行一系列血液相容性实验(水接触角实验、蛋白吸附实验、凝血时间、血小板激活实验)证明了改良的镍钛合金平片具有更好的血液相容性。然后我们通过人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖实验、迁移实验和人内皮祖细胞(EPC)捕获实验证明改良后的药物镍钛合金片具有较裸平片更好的促进内皮细胞增殖效果及捕获内皮祖细胞的能力。我们用相同的方法构建新型的颅内药物支架，并用荧光抗体在激光共聚焦显微镜下观察同时加载VEGF及抗CD34抗体的支架，并再次进行HUVEC的细胞增值实验及人内皮祖细胞(EPC)的细胞捕获实验。结果改良后的新型颅内药物洗脱支架较裸支架具有更好的血液相容性及促进血管内皮化的能力。结论新型颅内药物洗脱支架理论上在解决因动脉瘤载瘤动脉瘤颈部内皮化不足导致的动脉瘤复发率高企的问题上较现今的裸支架更具优势。

目录

声明

1.绪论

1.1颅内动脉瘤

1.1.1颅内动脉瘤的介绍

1.1.2颅内动脉瘤的治疗现状

1.2 药物洗脱支架的应用研究现状

2.1主要材料及试剂

2.2实验方法

2.2.1药物镍钛合金片的制备及其检测实验

2.2.2药物镍钛合金平片的血液相容性实验

2.2.3药物镍钛合金平片对脐静脉内皮细胞（HUVEC）的影响

2.2.4新型颅内药物支架的制备及其相关实验

3.实验结果

4.讨论

5.结论

6.不足及展望

参考文献

附记