昼夜节律紊乱通过TGF-β1介导的细胞衰老影响肝损伤预后

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英文缩略词对照表

引言

第一章 节律紊乱小鼠模型的构建与鉴定

1 实验材料

1.1 试剂与耗材

1.2 实验仪器

1.3 实验动物

2 实验方法

2.1 动物的分组、造模

2.2 观察指标

2.3 标本采集及处理

2.4 小鼠日常活动监测

2.5 血清转氨酶检测

2.6 实时荧光定量PCR

2.7 统计学处理

3 实验结果

3.1 节律紊乱对小鼠体重及饮食情况的影响

3.2 节律紊乱对小鼠行为学的影响

3.3 持续光照对小鼠肝组织节律基因的影响

4 讨论

5 小结

第二章 D-GalN /LPS急性肝损伤模型造模最适剂量探索

1 实验材料

1.1 试剂与耗材

1.2 实验仪器

1.3 实验动物

2 实验方法

2.1 供试品配制及浓度梯度设定

2.2 动物的分组、造模

2.3 小鼠生存情况观察及生存曲线的绘制

2.4 标本采集及处理

2.5 血清转氨酶检测

2.6 肝组织HE染色

2.7 统计学处理

3 实验结果

3.1 D-GalN /LPS梯度给药对小鼠生存率的影响

3.2 D-GalN /LPS梯度给药对小鼠血清转氨酶的影响

3.3 D-GalN /LPS梯度给药对小鼠肝组织形态学的影响

4 讨论

5 小结

第三章 基于细胞衰老途径研究昼夜节律紊乱对小鼠急性肝损伤预后的影响

1 实验材料

1.1 试剂与耗材

1.2 实验仪器

1.3 实验动物

2 实验方法

2.1 供试品配制

2.2 动物的分组、造模

2.3 小鼠生存情况观察及生存曲线的绘制

2.4 标本采集及处理

2.5 血清转氨酶检测

2.6 血清炎症因子（IL-6、TNF-α）ELISA检测

2.7 肝组织HE染色

2.8 TUNEL荧光染色

2.9 实时荧光定量PCR

2.10 Western-Blot法检测蛋白质含量

2.11 SA-β-gal染色

2.12 P53、P21双标免疫荧光染色

2.13 统计学处理

3 实验结果

3.1 昼夜节律紊乱对ALI小鼠死亡率的影响

3.2 昼夜节律紊乱对ALI小鼠血清转氨酶及炎症因子水平的影响

3.3 昼夜节律紊乱对ALI小鼠肝组织形态学的影响

3.4 昼夜节律紊乱对ALI小鼠肝细胞死亡的影响

3.5 节律紊乱合并肝损伤小鼠肝组织SA-β-gal活性改变

3.6 节律紊乱合并肝损伤小鼠肝组织衰老基因转录水平改变

3.7 肝损伤严重程度并非CD+ALI 组小鼠衰老基因转录水平的变化的主要原因

3.8 节律紊乱合并肝损伤小鼠肝组织衰老蛋白表达水平改变

3.9 节律紊乱合并肝损伤小鼠存在非细胞自主性衰老现象

3.10 节律紊乱合并肝损伤小鼠TGF-β/Smad信号被激活

3.11 节律紊乱导致小鼠肝内TGF-β1蓄积

4 讨论

5 小结

第四章 TGF-β 受体Ⅰ抑制剂LY2157299 对节律紊乱合并肝损伤的疗效研究

1 实验材料

1.1试剂与耗材

1.2 实验仪器

1.3 实验动物

2 实验方法

2.1 供试品配制

2.2 动物的分组、造模

2.3 小鼠生存情况观察及生存曲线的绘制

2.4 标本采集及处理

2.5 血清转氨酶检测

2.6 血清炎症因子（IL-6、TNF-α）ELISA检测

2.7 肝组织HE染色

2.8 实时荧光定量PCR

2.9 Western-Blot法检测蛋白质含量

2.10统计学处理

3 实验结果

3.1 TGF-β受体Ⅰ抑制剂对节律紊乱合并肝损伤小鼠肝损伤严重程度的影响

3.2 TGF-β受体Ⅰ抑制剂对TGF-β1/Smad信号通路的抑制作用

3.3 TGF-β受体Ⅰ抑制剂对节律紊乱合并肝损伤小鼠细胞衰老相关组分的影响

4 讨论

5 小结

结论

参考文献

文献综述:肝损伤后肝细胞再生机制及相关信号通路

致谢