玫瑰石斛功能成分与生物碱含量研究

摘要

玫瑰石斛(Dendrobium crepidatzIHI Lindl.ex Paxt.)是兰科石斛属多年生附生草本植物，具有较高保健和药用价值。本研究利用超高液相色谱一质谱联用(UPLC—MS)技术和气相色谱一质谱联用(GC.MS)技术，对玫瑰石斛茎和叶中的生物碱的成分和含量进行了系统性研究。同时，以玫瑰石斛不同年龄的茎、叶为材料，探索在不同季节、不同部位的玫瑰石斛总生物碱含量的变化，为生产实践中确定玫瑰石斛的最佳采收期和采收部位提供科学依据。本研究结论如下:　　(1)玫瑰石斛生物碱种类丰富，以中氮茚类生物碱为主。从玫瑰石斛茎和叶中共鉴定出15种成分，其中12种生物碱成分，3种联苄类成分。生物碱成分中包含8种中氮茚类生物碱:玫瑰石斛碱(1)、玫瑰石斛胺(2)、玫瑰石斛啶碱(3)、玫瑰石斛碱B(4)、玫瑰石斛碱C(5)、玫瑰石斛碱D(6)、玫瑰石斛碱E(7)，Homocrepidine B(8);4种倍半萜类生物碱:石斛碱(9)、石斛酮碱(10)、N-异戊烯基石斛碱(11)、N-异戊烯基石斛星碱(12);3种联苄类成分包括Crepidatuol A(13)、杓唇石斛素(14)和玫瑰石斛素(15)。　　(2)4种倍半萜类生物碱，石斛碱、N-异戊烯基石斛碱、N-异戊烯基石斛星碱、石斛酮碱皆为首次在玫瑰石斛中发现。前人研究在玫瑰石斛中仅有中氮茚类生物碱存在，该研究首次在玫瑰石斛中发现有倍半萜类生物碱成分。　　(3)本研究进行了玫瑰石斛生物碱成分的定量分析，明确了主要成分含量由大到小依次为玫瑰石斛啶碱、玫瑰石斛胺、玫瑰石斛碱B、玫瑰石斛碱D、玫瑰石斛碱及玫瑰石斛碱C。　　(4)提供了一种有效的玫瑰石斛茎的GC—MS分析方法，鉴定出41种挥发性成分。其中含氮化合物共14种，相对含量占所有化合物总含量的47.09％，从中鉴定出两种生物碱:玫瑰石斛胺和异玫瑰石斛胺;挥发性成分中含有较多的亚油酸甲酯、亚油酸乙酯、水杨酸甲酯、棕榈酸甲酯、亚麻酸甲酯等，对人体有较好的保健价值。　　(5)玫瑰石斛叶中生物碱成分与含量类似于茎，总生物碱含量可观。通过UPLC-MS技术对玫瑰石Nnt生物碱类成分定量研究，玫瑰石斛碱C、石斛碱、玫瑰石斛啶碱、玫瑰石斛碱D、玫瑰石斛碱E、玫瑰石斛素6种成分在叶中的含量均高于茎。玫瑰石斛叶中生物碱含量丰富，具有叶茶及功能食品开发价值。　　(6)玫瑰石斛一年生茎的总生物碱含量高于当年生茎和二年生茎，是最佳的采收部位。玫瑰石斛总生物碱含量在8月到11月不断积累，当年生茎、一年生茎和叶的总生物碱含量均在10月份达到最大值，而二年生茎的总生物碱含量在11月份达到最大值，到次年1月开始有所下降。玫瑰石斛在10月和11月生物碱含量高，这两个月份是玫瑰石斛较合适的采收期。　　(7)玫瑰石斛上部茎的总生物碱含量高于下部，茎下部叶片的总生物碱含量高于上部叶。因此，若在生产中于10月份对当年生茎仅采收叶片，主要采收下部叶，留上部叶进行光合;第二年10月采收一年生茎，重点采收上部茎。　　综上所述，本研究得出10月玫瑰石斛一年生茎上部为最佳采收期和采收部位，明确了玫瑰石斛生物碱主要为玫瑰石斛碱、玫瑰石斛啶碱、玫瑰石斛胺、玫瑰石斛碱B、玫瑰石斛碱D及玫瑰石斛碱C。

目录

声明

摘要

第一章绪论

1．1研究背景及意义

1．2国内外研究现状

1．2．1药用石斛种类

1．2．2药用石斛采收期研究

1．2．3药用石斛采收年龄及部位研究

1．2．4玫瑰石斛主要化学成分及其药理作用研究

1．2．5植物生物碱成分的LC-MS与GC-MS研究

1．3研究目标及主要研究内容

1．3．1研究目标

1．3．2主要研究内容

1．4研究技术路线

第二章玫瑰石斛植株总生物碱含量变化研究

2．1材料、试剂及仪器

2．1．1试验材料

2．1．2试剂与仪器

2．2试验方法

2．2．1取样方法

2．2．2材料预处理

2．2．3生物碱含量的测定

2．3结果与分析

2．3．1不同生长年龄茎与叶总生物碱含量差异

2．3．2茎叶不同生长月份生物碱含量差异

2．3．3茎叶不同部位总生物碱含量差异

2．4小结

第三章UPLC．MS分析玫瑰石斛茎叶生物碱

3．1材料、试剂与仪器

3．1．1材料

3．1．2试剂与仪器

3．2试验方法

3．2．1样品处理

3．2．2供试品溶液制备

3．2．3标准曲线绘制

3．2．4分析条件

3．3结果与分析

3．3．1玫瑰石斛生物碱成分分析

3．3．2玫瑰石斛生物碱含量分析

3．4小结

第四章GC-MS分析玫瑰石斛茎小分子成分

4．1材料、试剂与仪器

4．1．1材料

4．1．2试剂与仪器

4．2试验方法

4．2．1样品处理

4．2．2分析条件

4．3结果与分析

4．3．1含氮化合物

4．3．2脂肪酸类与酯类化合物

4．3．3其它类化合物

4．4小结

第五章结论与讨论

5．1结论

5．1．1玫瑰石斛生物碱含量变化

5．1．2玫瑰石斛叶生物碱含量高

5．1．3玫瑰石斛生物碱以中氮茚类生物碱为主

5．1．4玫瑰石斛茎气质联用挥发性成分研究

5．2讨论

5．2．1玫瑰石斛采收期的确定

5．2．2玫瑰石斛采收年限确定

5．2．3玫瑰石斛生物碱成分

5．3展望

参考文献

致谢