中国水仙离体再生体系的建立

摘要

本研究以三个种源地(福建漳州、上海崇明、舟山普陀)‘玉玲珑’鳞茎盘为外植体诱导再生小鳞茎，以期找到鳞茎盘最佳消毒方法，得出最佳培养基，为离体快繁体系建立打下基础;三个种源地‘玉玲珑’的再生小鳞茎、上海种源地‘玉玲珑’中花梗、子房为外植体诱导愈伤组织，以期得到最佳愈伤诱导培养基;在相同培养基上诱导不同外植体，测定其在愈伤发生过程中内源激素含量与生理变化，为中国水仙离体发生过程提供一些生理方面的基础资料。主要研究结果如下:　　1.中国水仙鳞茎盘离体快繁体系构建　　(1)三个种源地‘玉玲珑’鳞茎盘最佳消毒方法不同。漳州和普陀:3％多菌灵溶液浸泡5h+75％酒精50s+20％次氯酸钠20min+0.1％PPM培养基;崇明:3％多菌灵溶液浸泡5h+75％酒精50s+20％次氯酸钠20min。(2)较高6-BA有利于鳞茎盘继代增殖。最佳增殖培养基:漳州与崇明:MS+9mg/L6-BA+1mg/L2，4-D+0.5mg/L NAA;普陀:MS+9mg/L6-BA+0.5mg/L2，4-D。(3)最佳小鳞茎诱导培养基:漳州:MS+3mg/L6-BA+0.1mg/L2，4-D;崇明和普陀:MS+3mg/L6-BA+0.1mg/L2，4-D+0.5mg/L NAA。(4)生根率可达100％，最佳生根培养基:1/2MS+15g/L蔗糖+4.6g/L卡拉胶+1.0mg/LNAA+2g/L AC。　　2.愈伤组织的诱导　　(1)三个种源地‘玉玲珑’再生小鳞茎进行愈伤组织诱导，愈伤诱导率为56.67-58.89％，最佳培养基:漳州MS+3.0mg/L6-BA+3.0mg/L2，4-D+1.0mg/L NAA;崇明MS+3.0mg/L6-BA+3.0mg/L2，4-D+3.0mg/L NAA;普陀MS+3.0mg/L6-BA+9.0mg/L2，4-D+1.0mg/LNAA。(2)花梗诱导率最高可达100％，最佳培养基为MS+3.0mg/L6-BA+2.0mg/L2，4-D+1.5-2.5mg/L NAA+1.0mg/L KT;表面刻伤未抽葶期子房可以提高诱导率;盛花期子房刻伤后诱导率没有明显提高。未抽葶期两类子房最佳诱导培养基分别为MS+2.0mg/L6-BA+6.0mg/L2，4-D+2.5mg/L NAA+1.0mg/L KT;MS+1.0mg/L6-BA+6.0mg/L2，4-D+2.5mg/L NAA+0.5mg/L KT。盛花期两类子房最佳诱导培养基分别为MS+3.0mg/L6-BA+6.0mg/L2，4-D+3.5mg/L NAA+0.5mg/L KT;MS+3.0mg/L6-BA+6.0mg/L2，4-D+1.5-3.5mg/L NAA+0.5mg/L KT。　　3.不同部位愈伤组织诱导过程中内源激素变化　　(1)引入培养指数评价不同外植体在相同培养基诱导愈伤组织综合效果。(2)在愈伤组织诱导过程中，启动期与分裂期的ABA、IAA含量较低，在形成期时，ABA含量较高，在形成期时IAA的变化出现不同，其中嫩叶、花药含量下降，而花梗、子房却上升。(3)嫩叶ABA/GA3愈伤诱导启动期上升，其他三种外植体下降，分裂期下降，其他三种外植体上升;子房ABA/GA3在形成期上升，其他三种外植体下降。花梗、花药与子房IAA/ZR在整个愈伤诱导过程中都下降。叶片与花梗在愈伤启动期时IAA/GA3变化趋势相反，在分裂期与形成期时变化相同。花药与子房ABA/ZR在启动期时下降，与嫩叶变化趋势相反，三者在分裂期与形成期均下降。　　4.不同部位愈伤组织分化过程中生理变化　　花梗、叶片在愈伤组织诱导过程中SOD、POD及CAT活力变化整体呈倒“V”型。花药POD、SOD、CAT变化趋势大致相同，子房POD、SOD、CAT变化趋势也大致相同。叶片等四种外植体在愈伤诱导过程中蛋白质含量均先下降，但花梗与叶片在第7d消耗到最低，子房在第14d消耗量达到最大，而花药是在第3d时达到第一个低点，随后上升。叶片和花梗在第7d后、子房在第14d后蛋白质含量上升。四种不同类型外植体在可溶性糖的变化整体上均呈下降趋势。

目录

声明

摘要

第一章绪论

1．2．1水仙离体快繁技术研究进展

1．2．2植物离体培养过程中内源激素及生理的研究进展

1．3研究内容和意义

1．3．1研究内容

1．3．2研究意义

1．3．3技术路线

第二章中国水仙‘玉玲珑’鳞茎盘组培快繁体系构建

2．1材料与方法

2．1．1试验材料

2．1．2试验方法

2．2结果与分析

2．2．1消毒效果比较

2．2．2水仙初代、继代培养

2．2．3分化诱导培养

2．2．4不同激素对小鳞茎生根的影响

2．3讨论

第三章组培再生小鳞茎、花梗及子房的愈伤组织诱导

3．1材料与方法

3．1．1试验材料

3．1．2试验方法

3．1．3数据计算与处理

3．2结果与分析

3．2．1不同产地再生小鳞茎诱导愈伤组织

3．2．2不同外植体消毒结果

3．2．3不同外植体愈伤诱导结果

3．3讨论

第四章嫩叶及花器官愈伤诱导过程中内源激素变化研究

4．1试验材料与方法

4．1．1试验材料

4．1．2试验方法

4．1．3数据计算与处理

4．2结果与分析

4．2．1不同外植体诱导愈伤组织效果

4．2．2不同部位愈伤诱导过程中内源激素含量

4．2．3不同部位愈伤诱导过程中内源激素比值分析

4．3讨论

第五章不同部位愈伤组织诱导过程中生理变化研究

5．1试验材料与方法

5．1．1试验材料

5．1．2试验方法

5．2结果与分析

5．2．1不同部位愈伤诱导过程中抗氧化酶活性变化

5．2．2愈伤诱导过程中可溶性蛋白含量的变化

5．2．3愈伤组织诱导过程中可溶性糖含量的变化

5．2．4不同外植体愈伤诱导过程中生理指标相关性分析

5．3讨论

第六章结论与展望

6．1结论

6．2讨论

6．3展望

参考文献

附录

在读期间的学术研究

致谢