金线莲多倍体诱导及杂交育种初步研究

摘要

本研究通过秋水仙素和二甲戊乐灵对金线莲进行多倍体诱导，检测并鉴定其倍性差异，确定是否倍性水平越高，金线莲品质越好，植株越粗壮，抗逆性越强，进而产生更为优良的金线莲品系。除此之外，采用杂交技术从亲本获得优良性状，结合尖叶金线莲与圆叶金线莲的优良特点，创建具有高活性成分及抗病性强的新品系。　　采用不同浓度的秋水仙素和二甲戊乐灵对金线莲茎节进行多倍体诱导，得出秋水仙素最佳诱导条件:浓度为700mg·L-1，诱导时间24h，存活率达到50％，诱变率43.3％;二甲戊乐灵最佳诱导条件:浓度90mg·L-1，诱导时间48h，存活率达到56.7％，诱导率50.0％。获得的多倍体植株形态和对照株相比:叶片明显变大，根系茎节粗壮，但多倍体植株生长发育非常缓慢。实验还通过流式细胞术，确定了其在倍性水平上存在差异。　　将尖叶金线莲和圆叶金线莲进行种内杂交，用石蜡切片技术和荧光显微镜观察胚胎发育和花粉-雌蕊相互作用，结果显示，花粉管生长可以到达胚囊完成双受精，进而说明，受精前障碍不是尖叶金线莲和圆叶金线莲杂交障碍的主要因素。杂交后胚胎发育异常，最终导致胚败育，进而验证了受精后障碍应是尖叶金线莲和圆叶金线莲杂交中结实率低的原因。同时，我们将败育的幼胚进行了胚胎拯救并成功培养出了杂种金线莲，为以后的金线莲新品种研究奠定了基础。

目录

声明

摘要

第一章 综述

1 金线莲种质资源概况

1．1 金线莲生物学特性

1．2 金线莲的应用价值

1．3 金线莲主要研究历程

2 药用植物多倍体育种研究

2．1 多倍体植物的特点及现状

2．2 诱导获得多倍体药用植物的意义

2．3 诱变剂的选择

2．4 诱导处理浓度和时间的影响

2．5 多倍体的鉴定方法

3 药用植物杂交育种研究

3．1 杂交的不亲和性

3．2 杂种的不育性

3．3 杂交障碍的克服

4 研究的目的及意义

第二章 金线莲多倍体诱导及鉴定

1 材料与方法

1．1 供试金线莲材料

1．2 MS培养基成分

1．3 培养基的配置

1．4 秋水仙素诱导金线莲染色体加倍

1．5 二甲戊乐灵诱导金线莲染色体加倍

1．6 金线莲倍性水平的鉴定

2 结果与分析

2．1 秋水仙素对金线莲的诱变效果

2．2 二甲戊乐灵对金线莲的诱变效果

2．3 金线莲倍性水平鉴定

3 讨论

3．1 秋水仙素诱导金线莲染色体加倍

3．2 二甲戊乐灵诱导金线莲染色体加倍

第三章 金线莲花粉柱头互作、胚胎发育及幼胚拯救

1．3 花粉萌发和花粉-雌蕊相互作用

1．4 授粉后的胚胎发育

1．5 幼胚拯救

2 结果与分析

2．1 花粉萌发、花粉管生长和受精

2．2 胚和胚乳发育

2．3 幼胚拯救

3 讨论

3．1 金线莲杂交结实率低的因素

3．2 杂交金线莲胚胎败育的因素

结论

参考文献

致谢