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利用超分辨成像研究非小细胞肺癌细胞膜Trop2蛋白分布及其调控机制

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前言

第1章 文献综述

1.1 肺癌概述

1.1.1 肺癌流行病学

1.1.2 癌症相关细胞膜蛋白

1.1.3 肺癌的靶向治疗

1.2 超分辨显微成像技术概述

1.2.1 超分辨成像技术发展与原理

1.2.2 基于单分子定位的超分辨显微镜——dSTORM

1.2.3 基于超分辨成像技术的荧光探针

1.3 超分辨成像技术的相关研究示例

1.4 超分辨成像技术的未来展望

1.5 本论文的研究目的和主要内容

第2章 dSTORM研究Trop2在NSCLC细胞膜上的分布

2.1 概述

2.2 实验仪器与试剂

2.2.1 主要常规实验仪器及耗材

2.2.2 超分辨成像系统的搭建

2.2.3 主要成品实验试剂

2.2.4 主要实验试剂配制及贮存

2.3 实验方法

2.3.1 细胞系培养

2.3.2 玻片清洗

2.3.3 新鲜人类原代肺癌组织和癌旁组织细胞的提取

2.3.4 dSTORM细胞样品的制备

2.3.5 dSTORM荧光图像的采集

2.4 实验数据处理

2.4.1 超分辨数据的图像构建与定位点密度计算

2.4.2 超分辨图像的分辨率评估——NanoJ-SQUIRREL

2.4.3 基于定位点的超分辨显微数据分割和量化方法——SR-Tesseler

2.5 实验结果

2.5.1 dSTORM采集原始图像帧数的确定

2.5.2 确定dSTORM实验中Trop2的最佳标记浓度

2.5.3 Trop2分布假象的避免

2.5.4 dSTORM超分辨图像的分辨率测定

2.5.5 Trop2在不同NSCLC细胞膜表面的超分辨成像

2.5.6 Trop2在不同细胞系表面分布的量化分析

2.5.7 Trop2在人类原代肺癌细胞上的分布特征

第3章 应用dSTORM研究Trop2在细胞膜上的分布机制

3.1 细胞极性对Trop2分布特征的影响及差异

3.1.1 概述

3.1.2 实验仪器与试剂

3.1.3 实验方法

3.1.4 实验结果及讨论

3.2 脂筏结构对Trop2蛋白分布的影响

3.2.1 概述

3.2.2 实验仪器与试剂

3.2.3 实验方法

3.2.4 实验结果及讨论

3.3 肌动蛋白骨架对Trop2分布特征的影响及差异

3.3.1 概述

3.3.2 实验仪器与试剂

3.3.3 实验方法

3.3.4 实验结果及讨论

3.4 IGF-1刺激对不同细胞膜上Trop2蛋白分布的影响

3.4.1 概述

3.4.2 实验仪器与试剂

3.4.3 实验方法

3.4.4 实验结果及讨论

第4章 破坏Trop2在细胞膜成簇对信号蛋白及细胞表型的影响

4.1 概述

4.2 实验仪器与试剂

4.3 实验方法

4.3.1Western Blot实验流程

4.3.2 Transwell实验流程

4.3.3 细胞划痕实验流程

4.4 实验结果及讨论

第5章 结论及创新点

创新点

结论

参考文献

作者简介及在学期间取得学术成果

致谢

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著录项

  • 作者

    付义林;

  • 作者单位

    吉林大学;

  • 授予单位 吉林大学;
  • 学科 外科学
  • 授予学位 博士
  • 导师姓名 佟倜;
  • 年度 2021
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 TN9TG1;
  • 关键词

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