PDI--1作为免疫检查点抑制剂治疗非小细胞肺癌和黑色素瘤

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摘要

中英文缩略词表

引言

1实验材料

1．1实验细胞株

1．2实验鼠

1．3主要实验试剂

1．4主要仪器

1．5主要试剂的配制

1．5．1抗体的配制

1．5．2细胞培养试剂

1．5．3抗原修复液-酸性(10×)

2实验方法

2．1细胞培养技术

2．1．1细胞复苏

2．1．2细胞传代

2．1．3细胞冻存

2．2细胞活力实验

2．3细胞共培养实验

2．4竞争性ELISA实验(PD-1／PD-L1抑制剂筛选)

2．5ELISA实验

2．6外周血单个核细胞分离

2．6．1CD3+T细胞分选

2．6．2CD3+T细胞激活

2．7细胞移植瘤实验

2．7．1细胞培养

2．7．2体内实验

2．8石蜡包埋及组织切片的制作

2．9HE染色

2．10多重免疫荧光实验(mIHC)

2．11多细胞因子分析实验

2．12T细胞亚群检测

2．13肿瘤组织单细胞分离

2．14统计学方法

3结果

3．1 PDI-1通过与PD-1及PD-L1结合阻断PD-1和PD-L1之间的相互作用

3．2 PDI-1在体外通过增强T细胞的细胞毒性及增加细胞因子的产生来杀伤肿瘤细胞

3．3PDI-1通过CD28-TCR信号通路恢复T细胞活性

3．4构建PD-L1人源化小鼠肿瘤细胞系

3．6PDI-1在体内抑制黑色素瘤的生长

3．7PDI-1在体内抑制NSCLC肿瘤的生长

3．8PDI-1在体内增强T细胞介导的抗肿瘤反应

3．9PDI-1可在短时间内增强宿主对癌症的免疫反应

4讨论

5结论

参考文献

综述 免疫检查点PD-1／PD-L1的特征

个人简历

致谢