艾迪注射液对人肝癌多药耐药细胞的逆转作用研究

摘要

目的：探讨艾迪注射液对人肝癌多药耐药细胞 Bel-7402/5-FU的耐药性是否具有逆转作用及其可能的逆转机制。　　方法:1.采用5-氟尿嘧啶（fluorouracil,5-FU）通过浓度梯度递加法建立人肝癌耐药细胞 Bel-7402/5-FU。2.待耐药细胞Bel-7402/5-FU建立成功后，将实验分为两组，即 Bel-7402组和 Bel-7402/5-FU组，将两组细胞种植于96孔板中，待细胞贴壁稳定后，再将每种细胞分为7个小组，每种细胞的第一组加入正常培养基，后面六组分别加入含5-FU、ADM、MMC、MTX、CTX、CDDP的培养基，每孔终体积为200 ul，培养24h后，每孔加入10ul的cck-8试剂，继续培养2h后，酶标仪在450nm下读取吸光度值，使用SPSS19.0统计软件计算每种化疗药物对亲本细胞 Bel-7402及耐药细胞Bel-7402/5-FU的半数抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50），计算6种化疗药物 Bel-7402细胞和 Bel-7402/5-FU细胞的抑制率(IR)和Bel-7402/5-FU的耐药指数(RI)。3.通过不同浓度的艾迪注射液作用于Bel-7402/5-FU后，cck-8法检测艾迪注射液对Bel-7402/5-FU是否具有抑制作用。4.将实验分为3组，即 Bel-7402组、Bel-7402/5-FU组和艾迪注射液作用过的Bel-7402/5-FU组，分别提取三组细胞中的总蛋白后，Western blot法检测三组细胞中多药耐药相干蛋白1(MRP1)、P-糖蛋白(P-gp，170kD)、程序化死亡因子5（PDCD5，15kD）蛋白的表达情况。　　结果：1、Bel-7402/5-FU细胞对6种化疗药物的半数抑制浓度较Bel-7402细胞明显升高，对6种化疗药物表现出不同程度的耐药性。2、艾迪注射液对 Bel-7402/5-FU细胞具有抑制作用，且随着艾迪注射液浓度的增加，抑制作用越强。3、与Bel-7402细胞相比，Bel-7402/5-FU细胞株中MRP1、P-gp表达明显升高，PDCD5表达较低。使用半数抑制浓度的艾迪注射液分别作用于Bel-7402细胞及Bel-7402/5-FU细胞后，与Bel-7402/5-FU细胞相比，经过艾迪注射液作用后的Bel-7402/5-FU细胞中MRP1、P-gp表达降低，PDCD5表达增高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。　　结论：艾迪注射液对肝癌细胞的多药耐药性具有一定的逆转作用，其机制与降低多药耐药相关蛋白1和P-糖蛋白的表达，促进凋亡相关蛋白5的表达有关。

目录

声明

英文缩略词表

0 引 言

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结 果

2.1 Bel-7402/5-FU细胞的成功建立（见图2）

2.2 Bel-7402细胞及Bel-7402/5-FU细胞对6种化疗药物的敏感性检测结果

2.3艾迪注射液对Bel-7402/5-FU细胞的抑制率及半数抑制浓度

2.4 MRP1、P-gp及PDCD5蛋白在Bel-7402细胞、Bel-7402/5-FU细胞及经艾迪注射液作用后的Bel-7402/5-FU细胞中的表达情况

3 讨 论

3.1 Bel-7402/5-FU的成功建立及耐药性检测结果

3.2艾迪注射液对Bel-7402/5-FU细胞多药耐药性的逆转机制

4 结 论

参考文献

综述：逆转肝癌多药耐药的研究进展

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