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【6h】

电针对分娩大鼠中枢相关神经递质及受体基因与蛋白表达影响的研究

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声明

摘要

引言

1 实验材料

1.1 实验动物

1.2 实验试剂

1.3 实验器材及仪器

2 实验方法

2.1 动物模型的建立

2.2 分组

2.3 大鼠痛阈测定

2.4 标本采集

2.5 采用ELISA法检测血清

2.6 Real-time PCR检测方法

2.7 Western Blot检测方法

2.8 统计学处理

3 结果

3.1 痛阈值结果比较

3.2 不同穴位电针对强啡肽及其K受体调控表达的影响

3.3 不同穴位电针对五羟色胺及其2A受体调控表达的影响

4.讨论

4.1 对分娩疼痛的认识

4.2 分娩疼痛的产生机制

4.3 分娩疼痛对母体的影响

4.4 分娩镇痛必要性及现状

4.5 中枢相关神经递质及受体与分娩镇痛

4.6 针灸与分娩疼痛的关系

5 存在的问题以及展望

结论

参考文献

缩略词表

综述 非药物性分娩镇痛的研究进展

致谢

个人简介及攻读学位期间获得的科研成果

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摘要

目的:探究不同穴位电针对分娩大鼠中枢相关神经递质及受体基因与蛋白表达的影响,为分娩镇痛的治疗提供新的视角,为针刺镇痛的推广和应用提供了进一步的实验依据。  方法:将未交配性成熟的SD雌鼠150只,分别与SD雄鼠合笼,选用造模成功的SD雌鼠120只按随机数字表分为六组:空白组20只,三阴交组20只,合谷组20只,合谷加三阴交组20只,血海组20只,西药组20只。空白对照组20只,未进行任何处理,自然分娩;电针穴位组在中医理论指导下,根据实用大鼠针灸穴位图谱定位大鼠腧穴,于临产开始选用不同穴位电针给予镇痛;西药组20只,于临产开始给予盐酸哌替啶镇痛。六组均采用热水甩尾痛阈测定法测大鼠的痛阈,比较六组大鼠分娩镇痛的效应,运用ELISA法检测血清强啡肽、五羟色胺含量的调控影响。运用Real-timePCR、Western blot法分别检测大脑灰质顶叶区及脊髓腰椎彭大端强啡肽及其K受体基因、蛋白含量;五羟色胺及其2A受体基因、蛋白含量。最后用SPSS20.0软件对数据进行统计分析。  结果:  痛阈值:  1、干预前:各组大鼠的痛阈值差异无显著性,差异无统计学意义(P>0.05)。  2、干预后:各组大鼠的痛阈值差异无显著性,差异无统计学意义(P<0.01),其中电针穴位组及药物组优于空白组,其中电针穴位组内由高至依次为比较:三阴交组>合谷组>合谷加三阴交组>血海组。  强啡肽及K受体:  1、血清含量检测:各组大鼠干预后血清中强啡肽含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。电针穴位组及药物组优于空白组。电针穴位组从高到低依次为:三阴交组>合谷组>三阴交加合谷组>血海组。  2、基因表达:各组大鼠大脑灰质顶叶区强啡肽及K受体基因表达量差异无统计学意义(P>0.05);各组大鼠脊髓腰椎彭大端强啡肽及K受体基因表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。电针穴位组及药物组优于空白组。电针穴位组从高到低依次为:三阴交组>合谷组>三阴交加合谷组>血海组。  3、蛋白表达:各组大鼠大脑灰质顶叶区强啡肽及κ受体蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05);各组大鼠脊髓腰椎彭大端强啡肽及K受体基因表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。电针穴位组及药物组优于空白组。电针穴位组从高到低依次为:三阴交组>合谷组>三阴交加合谷组>血海组。  五羟色胺及2A受体:  1、血清含量检测:各组大鼠干预后血清中五羟色胺含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。空白组优于电针穴位组及药物组,电针穴位组从高到低依次为:血海组>合谷组>三阴交组>合谷加三阴交组。  2、基因表达:各组大鼠大脑灰质顶叶区、脊髓腰椎彭大端五羟色胺及2A受体基因表达均量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),电针穴位组及药物组优于空白组。电针穴位组从高到低依次为:合谷加三阴交组>三阴交组>合谷组>血海组。  3、蛋白表达:各组大鼠大脑灰质顶叶区、脊髓腰椎彭大端五羟色胺及2A受体蛋白表达均量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),电针穴位组及药物组优于空白组。电针穴位组从高到低依次为:合谷加三阴交组>三阴交组>合谷组>血海组。  结论:  1、不同穴位电针可使大鼠分娩痛阈值升高,具有镇痛作用。  2、不同穴位电针可使强啡肽在血清中含量升高,可使强啡肽及其κ受体在脊髓腰椎膨大段基因、蛋白表达量升高作用来达到不同程度的镇痛效应。  3、不同穴位电针可使五羟色胺在血清中含量降低,可使五羟色胺及其2A受体在大脑灰质顶叶区、脊髓腰椎彭大端基因、蛋白表达量升高作用来达到不同程度的镇痛效应。

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