鼻渊冲洗剂——五黄液复方体外杀菌实验及有效单体的遴选及含量测定的药理学研究

摘要

目的：鼻-鼻窦炎(rhinosinusit)是一种以鼻腔黏膜、鼻窦粘膜为炎性特征的鼻科常见疾病。鼻-鼻窦炎的治疗手段主要包括药物治疗、手术治疗两大类。其中，鼻腔冲洗作为鼻-鼻窦炎重要的辅助治疗手段，在其治疗中广泛应用，且在临床上效果显著。以欧洲鼻窦炎治疗指南(EPOS2012)及中国慢性鼻-鼻窦炎诊疗指南(昆明，2012)为例，，均推荐鼻腔冲洗作为围手术期的A类治疗手段。目前，等渗盐水、氨基多糖季铵盐冲洗液、高渗盐水以及中药冲洗液等在鼻腔冲洗中均得到广泛应用。其中，中药冲洗液在临床中效果较好，且在国内积累了大量临床疗效观察疗效数据。但是中药冲洗剂缺乏药理学基础的研究，故而，通过研究中药冲洗液中有效单体的成分，有利于阐明中药复方的药理作用机制及量效关系，有利于质量标准的控制，同时也是新药研究不可或缺的一步。五黄液作为本院院内制剂，由黄连、栀子、大黄、黄芩、黄柏组成，具有清热解毒的效果，长期作为慢性鼻-鼻窦炎鼻腔冲洗的常规药物。本院耳鼻咽喉科经过十多年的临床实践证实五黄液在患者术后辅助治疗中疗效显著，但缺乏现代药理学机制研究，本研究将从两方面对五黄液进行研究。首先以金黄色葡萄球菌为体外细菌模型，运用CKK8法测定五黄液体外杀菌细菌活性，从药理学基础角度上论证五黄液的抗菌性。在论证其抗菌效能的同时，对五黄液复方有效单体进行遴选及含量的测定，为探索五黄液的作用机制和有效单体的量效关系，质量标准的控制及新药研究提供一定的基础依据。　　方法：五黄液体外杀菌实验：通过通过CCK8反应显色调节酶标仪，可测出各浓度吸光度（OD值）、对照组（即仅加入培养基及金黄色葡萄球菌的菌液OD值）及CCK8对照孔OD值。通过细菌活性公式：细菌活性(％)=（A实验组-ABLANK）/(A对照组-ABLANK)×100％，可算出各浓度细菌活性值，在得到细菌活性值的基础上，利用统计学的方法与对照组进行成对样本检验，算出各浓度药物有无杀菌效能。五黄液复方有效单体的遴选及含量的测定：本研究旨在利用液相色谱仪及统计学方法对五黄液复方有效单体进行遴选及含量的测定。　　结果：五黄液体外杀菌实验：当浓度为100％浓度(P=0.01)、1/2浓度(P＜0.01)、1/4浓度(P=0.02)浓度时差异有统计学意义;当浓度为1/8浓度(P=O.016)、1/16浓度(P=O.008)时差异无统计学意义。因100％浓度因无细菌培养基故不设为参考对象。故仅比较1/2浓度和1/4浓度;当P值越小时，统计学差异越明显，故各组浓度比较，当五黄液浓度为1/2浓度时，杀菌效果最明显。五黄液复方有效单体的遴选及含量的测定：五黄液中小檗碱含量为：12.9874±ug/ml;芦荟大黄素含量为：0.605+ug/ml;大黄酸含量为：1.29±ug/ml大黄素含量为：O.1062±ug/ml;大黄酚含量为：O.0896±ug/ml;大黄素甲醚含量为：O.0354±ug/ml;黄芩苷含量为：0.205+ug/ml;栀子苷含量为：0.6292±ug/ml;与对照组对比(P＜0.05)。　　结论：证明五黄液复方冲洗液对金黄色葡萄球菌具有较好的抗菌性，同时再从五黄液有效成分及单体含量进行研究，为五黄液的药效物质基础提供参考，同时有利于五黄液质量标准的提高，用药安全及二次开发提供帮助。

目录

摘要

前言

1．五黄液的成分研究

2．五黄液复方单体有效成分的研究

3．五黄液的中医辨证思路与现代药理学的联系

4．CCK8的作用机制

5．高效液相色谱(HPLC)

实验材料及方法

材料和方法

讨论

1．五黄液治疗鼻-鼻窦炎的抗菌作用

2．鼻腔冲洗的作用机制

3 中药复方单体的研究

结论

参考文献

主要中英文缩略词表

中药复方单体的研究 综述

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