上颌窦黑色素瘤原位裸鼠模型的建立及其生物学特征

摘要

目的：建立可靠和稳定的上颌窦黑色素瘤原位裸小鼠模型，动态监测荷瘤鼠的生存情况和原位瘤的生长发展，并利用MRI(Magnetic Resonance Imaging，核磁共振成像)技术观察肿瘤局部浸润情况，为研究鼻腔鼻窦恶性肿瘤的发病机制及治疗手段提供合适的动物模型。　　方法：将实验动物麻醉后，俯卧位固定于手术板上，将B16（小鼠黑色素瘤细胞）细胞悬液注射到裸鼠右侧上颌窦，从右侧眶肌群下方经皮注射，针头朝向上颌窦外侧壁。采用随机数字表法，将24只雌性BALB/c裸鼠编号后分成三组，每组8只。A组(空白对照组，n=8)：每只裸鼠注射100μl无菌生理盐水;B组（实验组，n=8）：每只裸鼠注射100μl肿瘤细胞悬液，细胞悬液浓度为1×106个/ml，即每只裸鼠接种1×105个肿瘤细胞;C组（实验组，n=8）：每只裸鼠注射100μl肿瘤细胞悬液，细胞悬液浓度为5×106个/ml，即每只裸鼠接种5×105个肿瘤细胞。接种完成后，观察三组的成瘤率、成瘤时间、原位瘤体积大小、荷瘤鼠体重以及荷瘤鼠生存情况，并且采用MRI技术检测肿瘤局部浸润情况。实验数据采用SPSS17.0统计学软件进行分析。在研究肿瘤大小变化和荷瘤鼠体重变化的实验中，实验数据采用均数±标准差((x)±s)表示，并用单因素方差分析(one-way ANOVA)比较当接种不同浓度的肿瘤细胞悬液时两组原位瘤大小和荷瘤鼠体重是否存在差异，以α=0.05为检验标准，当P＜0.05时认为两者差异有统计学意义。实验裸鼠的生存分析采用Kaplan-Meier方法，并且经过对数秩检验(log-rank test)，以α=0.05为检验标准，当P＜0.05时认为差异有统计学意义。　　结果：(1)实验组16只裸鼠全部接种成功，原位瘤移植成功率为100％，接种5×105个肿瘤细胞的裸鼠成瘤时间为5-6天，中位时间为5天，接1×105个肿瘤细胞的裸鼠成瘤时间为6-8天，中位时间为8天;(2)形成的原位瘤体积大小变化情况与接种肿瘤细胞数量有关，在相同时间内，接种5×105个肿瘤细胞的裸鼠比接种1×105个肿瘤细胞的裸鼠所形成的原位瘤体积更大（P＜0.05）;(3)裸鼠体重变化情况与接种肿瘤细胞数量有关，在相同时间内，接种5×105个肿瘤细胞的裸鼠比接种1×105个肿瘤细胞的裸鼠体积下降更快(P＜0.05);(4)根据Kaplan-Meier生存曲线分析，接种5×105个肿瘤细胞的裸鼠生存期与接种1×105个肿瘤细胞的裸鼠生存期有显著差异(P＜0.05)，接种5×105个肿瘤细胞的裸鼠的中位生存期是24天，接种1×105个肿瘤细胞的裸鼠的中位生存期是30天;(5)对裸鼠头颈部的矢状位、冠状位和横断位进行MRI扫描，结果显示原位瘤向右侧鼻腔、右眼眶眶周和眶后壁以及颅底海绵窦侵袭浸润。　　结论：成功构建了上颌窦黑色素瘤原位裸鼠模型，成瘤率高，原位瘤的生长进展过程与人上颌窦黑色素瘤类似，为进一步研究鼻腔鼻窦恶性肿瘤的生物学特征及新的治疗策略特供了可行的实验工具。

目录

摘要

前言

1 实验材料与仪器

2 实验方法

结果

1 原位瘤的移植成功率

2 原位移植瘤生长情况

3 荷瘤鼠的一般情况观察

4 实验裸鼠的生存分析

5 肿瘤MRI检查

讨论

1 上颌窦黑色素瘤动物模型的研究意义和目的

2 关于上颌窦恶性肿瘤动物模型的国内外研究现状

3 上颌窦黑色素瘤原位裸鼠模型的建立

4 上颌窦黑色素瘤原位瘤裸鼠模型的应用价值

5 问题与展望

结论

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

头颈部肿瘤动物实验模型的建立及应用进展 综述

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