血清HBV RNA在慢性HBV感染管理中价值初探

摘要

研究背景：　　乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）慢性感染严重危害人类健康[1-2]。虽然现有的一线抗病毒治疗策略可有效抑制HBV复制、延缓疾病进展、降低肝硬化、肝癌发生率，但现有的抗病毒治疗策略，尤其是核苷（酸）类似物（nucleos(t)ide analogs，NAs）对肝内HBV共价闭合环状DNA（covalently closed circular deoxyribonucleic acid，cccDNA）无直接作用，故停药后复发率高[3-5]。肝内cccDNA是HBV持续感染和病毒耐药的主要原因[6]，故监测肝内cccDNA水平对于慢性HBV感染自然病程管理和抗病毒治疗管理均具有重要意义。目前尚缺乏标准化的肝内cccDNA定量检测方法，且肝内cccDNA检测需要肝组织学检测，这大大限制了cccDNA的临床应用[7-8]，导致临床需要寻找可量化肝内cccDNA水平的血清学替代指标。临床现行与肝内cccDNA水平相关的指标包括HBV DNA、HBV RNA和乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）[9-16]，尤其是HBsAg，在其定量检测方法商品化后在慢性HBV感染管理中发挥了一定作用[17-26]。然而，抗病毒相关基因突变、病毒基因组整合等因素导致HBsAg在慢性HBV感染管理中的价值存在一定局限性[27]。血清HBV RNA直接来源于cccDNA，可直接反映肝内cccDNA的转录活性[14-15]，因而在抗病毒治疗疗效预测和停药管理方面均可能具有重要价值。现有的研究报道存在样本数少、结论不统一等缺点，且罕见血清HBV RNA在慢性HBV感染自然病程管理中价值研究结果。因而，有必要进一步验证血清HBV RNA水平在慢性HBV感染管理中的价值。　　研究目的：　　1.通过检测慢性HBV感染自然病程不同阶段患者血清HBV RNA水平，以及分析不同阶段血清HBV RNA水平同其它病毒学指标相关性，探索血清HBV RNA在慢性HBV感染自然病程管理中的价值。　　2.监测NAs经治慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者不同治疗时间节点血清HBV RNA水平，分析血清HBV RNA同其它病毒学和血清学指标相关性，探讨NAs治疗对病毒转录水平的影响，并评价NAs治疗CHB患者停药基线不同病毒学指标对停药管理价值。　　研究方法（本研究分为两部分）：　　第一部分：血清HBV RNA在慢性HBV感染自然病程管理中价值：依据临床表现、生化学、血清学、病毒学指标及流行病学资料，共纳入291例未治疗的慢性HBV感染者。依据2015年美国肝病学会（AASLD）指南[4]标准将患者分为四组：免疫耐受（immune tolerant，IT）期35例、乙型肝炎e抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）阳性免疫活动（HBeAg-positive immune active，EPIA）期121例，非活动性CHB（inactive chronic hepatitis B，ICH）期77例、HBeAg阴性慢性乙型肝炎（HBeAg-negative chronic hepatitis B，ENH）期58例。采用RNA实时扩增检测（SAT）方法,对所有患者血清HBV RNA水平进行检测；评价血清HBV RNA的分布与病毒复制状态、免疫阶段、疾病分类、Child-Pugh分级的关系；分析血清HBV RNA与其他HBV血清标志物的相关性。　　第二部分：血清HBV RNA在长期NAs抗病毒治疗停药管理中价值：纳入163例NAs经治CHB患者，其中48例无肝硬化，且符合2015版AASLD指南停药标准的CHB患者停用NAs治疗，并完成24个月随访；采用HBV SAT方法对所有患者血清HBV RNA水平进行检测；依据血清HBV RNA水平和生化学指标变化对停药随访患者进行病毒学复发或临床复发监测。　　研究结果：　　第一部分：血清HBV RNA在慢性HBV感染自然病程管理中价值　　1.慢性HBV感染自然病程不同阶段血清HBV RNA水平存在显著差异：HBeAg阳性患者血清HBV RNA水平明显高于HBeAg阴性患者[6.82(5.57,7.98) Vs 2.40(2.00,5.23) log copies/ml，P＜0.0001]；慢性HBV感染自然病程的四个阶段中，以ICH期血清HBV RNA水平最低[2.00(2.00,3.04) log copies/ml]；在HBeAg阴性慢性HBV感染者中，ENH患者血清HBV RNA水平明显高于ICH患者[2.00(2.00,3.04) Vs 5.31(3.57,6.37),P=0.000]；但HBeAg阳性感染者中，IT和EPIA两组之间无明显差异。　　2.血清HBV RNA水平可有效鉴别HBeAg阴性感染再激活：血清HBV RNA＞2.11copies/ml可鉴别“ENH”和“ICH”两个阶段，其阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）分别为70.59%和86.15%。　　3.慢性HBV感染进程中血清HBV RNA同血清HBV DNA、HBsAg呈正相关：慢性HBV感染者中，血清HBV RNA水平与HBV DNA（r=0.793,P=0.000）和HBsAg （r=0.552,P=0.000）水平均呈正相关；尤其是HBeAg阳性者中。　　第二部分：血清HBV RNA在长期NAs抗病毒治疗停药管理中价值：　　1.血清HBV RNA和HBV DNA的水平在长期抗病毒治疗过程中均显著下降：治疗时间＞3年，血清HBV RNA和HBV DNA低于检测下限率分别为84.85%和 81.82%；　　2.停药基线（EOT）血清HBV RNA状态对NAs停药预测作用可能有限，EOT血清HBsAg水平是停药后病毒学复发的唯一的独立预测因素：多变量Logistic回归分析中，EOT血清HBV RNA状态对2年后病毒学复发预测的OR值为0.000，95%CI：0.000， P=0.999；　　3.低水平EOT血清HBsAg水平可成为HBsAg清除的替代治疗终点：多变量Logistic回归分析中EOT血清HBsAg对停药后2年病毒学复发预测的OR值为1.634 (95%CI, 0.980～2.725)；EOT血清HBsAg滴度＜10IU/ml对长期NAs治疗患者停药后的持久病毒学缓解的PPV为100%。　　结论：　　1.慢性HBV感染自然病程中，血清HBV RNA水平存在显著差异；　　2.血清HBV RNA水平可成为有效鉴别HBeAg阴性慢性HBV感染再激活的新指标；　　3.慢性HBV感染进程中血清HBV RNA与血清HBV DNA、HBsAg呈正相关；　　4.EOT血清HBV RNA状态对停药后病毒学复发预测价值有限；　　5.低水平EOT血清HBsAg如10IU/ml或100IU/ml可能成为HBsAg清除的替代治疗终点。

目录

声明

缩略词表

第一部分：血清HBV RNA在慢性HBV感染自然病程管理中价值

前言

一、研究对象与方法

(一)研究对象

(二)研究方法

(三)统计学处理

二、研究结果

(一)基本资料

(二)慢性HBV感染自然病程血清HBV RNA水平状态

(三)慢性HBV感染者血清HBV RNA同血清HBV DNA和HBsAg滴度正相关

(四)血清HBV RNA在慢性HBV感染管理中价值

(五)慢性HBV感染者血清HBV RNA与临床资料相关性

三、分析与讨论

四、结论

第二部分：血清HBV RNA对长期核苷(酸)类似物（NAs）治疗停药管理意义

前言

一、研究对象与方法

(一)研究对象

(二)研究方法

(三)统计学处理

二、研究结果

(一) NAs抗病毒治疗期间HBV病毒学指标和生化指标动态变化

（二）停药基线血清HBV RNA水平对NAs治疗患者停药管理

三、分析与讨论

四、结论

参考文献

综述:慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗疗效预测：从HBsAg到HBV RNA

在读期间发表论文和参加科研工作情况

致谢