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摘要
第一部分 基于SELEX技术构建响应小分子的RNA调控开关的体外筛选体系
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 适配体---核糖开关组装模块Ⅰ
1.3 表达平台---核糖开关组装模块Ⅱ
1.4 总结
第二章 实验材料与方法
2.1 实验材料、仪器和试剂
2.2 实验方法
第三章 实验结果分析
3.1 RNA库的体外转录/反转录及优化
3.2 RNA库的特异性鉴定
3.3 SELEX筛选体系优化
3.4 总结
第二部分 基于噬菌体T7 RNA聚合酶构建光激活的基因开关
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 T7 RNA聚合酶的结构特征和功能特性
1.3 光敏结构域的结构特征和功能特性
1.4 总结
第二章 实验材料与方法
2.1 实验材料、仪器和试剂
2.2 实验方法
第三章 实验结果与分析
3.1 不同拆分体系光诱导活性测定
3.2 光诱导蛋白-蛋白相互作用模式
3.3 光诱导别构效应调控聚合酶功能
3.4 时间维度上鉴定光诱导系统调控功能
3.5 T7 RNA聚合酶拆分体系和调控结构域的模块化组合
3.6 总结
第三部分 CRISPR-dCas9系统与反义RNA系统组合调控基因表达
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 CRISPR-dCas9系统---基因表达调控的模块化元件
1.3 Toehold switch---新颖的反义RNA调控系统
1.4 总结
第二章 实验材料和方法
2.1 实验材料、仪器和试剂
2.2 实验方法
第三章 实验结果与分析
3.1 CRISPR-dCas9阻抑效果检测
3.2 sgRNA-asRNA相互作用调控CRISPRi
3.3 总结
参考文献
附录
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果