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【6h】

吲哚类HDAC6/Tubulin双靶点抑制剂的筛选及其抗白血病作用研究

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目录

声明

摘要

符号说明

前言

1.吲哚类化合物的分类

1.1天然吲哚化合物

1.2合成吲哚化合物

2.吲哚类化合物的抗癌机制

2.1抗增殖作用

2.2诱导凋亡作用

2.3细胞周期阻滞作用

2.4肿瘤浸润和血管形成抑制作用

3.吲哚类化合物联合其它药物治疗癌症的研究进展

4.本课题的主要研究内容

实验材料

2.化合物

3.试剂

4.试剂配制

5.仪器设备

1.细胞培养

2.细胞生长抑制实验

2.1筛选具有抗肿瘤效果的活性化合物

2.2筛选对活性吲哚化合物敏感的肿瘤类型

2.3检测活性吲哚化合物对正常细胞的生长抑制作用

3.细胞形态观察

4.细胞摄取实验

5.细胞凋亡相关检测实验

5.1Hoechst 33342染色法

5.2Annexin V-FITC/PI双染法

5.3线粒体膜电位检测实验

5.4检测细胞内ROS水平

6.检测细胞周期分布实验

7.Transwell侵袭实验

8.吖啶橙染色实验

9.分子对接模拟实验

10.免疫荧光染色实验

11.秋水仙碱竞争性结合实验

12.Western blotting检测

13.裸鼠体内移植瘤实验

实验结果

1.筛选具有抗癌活性的吲哚化合物

2.活性化合物3ab和3ai抑制多种肿瘤细胞增殖

3.化合物3ab对人正常细胞株的细胞毒作用

4.化合物3ab诱导K562和HL-60细胞形态改变

5.化合物3ab能够被K562和HL-60细胞摄取

6.化合物3ab诱导K562和HL-60细胞凋亡

6.1Hoechst 33342染色法检测K562和HL-60细胞形态变化

6.2 AnnexinV-FITC/PI双染法定量检测化合物3ab诱导的K562和HL-60细胞凋亡率

6.3化合物3ab通过线粒体途径诱导K562和HL-60细胞凋亡

6.4化合物3ab对线粒体凋亡相关蛋白表达的调节作用

6.5化合物3ab增加K562和HL-60细胞内活性氧水平

7.化合物3ab诱导K562和HL-60细胞周期阻滞与G2/M期

8.化合物3ab抑制K562细胞侵袭能力

9.化合物3ab对K562和HL-60细胞自噬水平的影响

10.化合物3ab分子对接模拟实验

11.化合物3ab对K562和HL-60细胞微管蛋白的影响

12.化合物3ab对K562和HL-60细胞微管蛋白的秋水仙碱位点的影响

13.化合物3ab下调K562和HL-60细胞中HDAC6/EGFR/AKT/NF-κB信号通路

14.化合物3ab抑制裸鼠体内K562移植瘤的生长

讨论

结论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表和待发表的学术论文

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著录项

  • 作者

    乔兴慧;

  • 作者单位

    山东大学;

  • 授予单位 山东大学;
  • 学科 药理学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 郭秀丽;
  • 年度 2021
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R96R92;
  • 关键词

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