声明
摘要
符号说明
前言
1.吲哚类化合物的分类
1.1天然吲哚化合物
1.2合成吲哚化合物
2.吲哚类化合物的抗癌机制
2.1抗增殖作用
2.2诱导凋亡作用
2.3细胞周期阻滞作用
2.4肿瘤浸润和血管形成抑制作用
3.吲哚类化合物联合其它药物治疗癌症的研究进展
4.本课题的主要研究内容
实验材料
2.化合物
3.试剂
4.试剂配制
5.仪器设备
1.细胞培养
2.细胞生长抑制实验
2.1筛选具有抗肿瘤效果的活性化合物
2.2筛选对活性吲哚化合物敏感的肿瘤类型
2.3检测活性吲哚化合物对正常细胞的生长抑制作用
3.细胞形态观察
4.细胞摄取实验
5.细胞凋亡相关检测实验
5.1Hoechst 33342染色法
5.2Annexin V-FITC/PI双染法
5.3线粒体膜电位检测实验
5.4检测细胞内ROS水平
6.检测细胞周期分布实验
7.Transwell侵袭实验
8.吖啶橙染色实验
9.分子对接模拟实验
10.免疫荧光染色实验
11.秋水仙碱竞争性结合实验
12.Western blotting检测
13.裸鼠体内移植瘤实验
实验结果
1.筛选具有抗癌活性的吲哚化合物
2.活性化合物3ab和3ai抑制多种肿瘤细胞增殖
3.化合物3ab对人正常细胞株的细胞毒作用
4.化合物3ab诱导K562和HL-60细胞形态改变
5.化合物3ab能够被K562和HL-60细胞摄取
6.化合物3ab诱导K562和HL-60细胞凋亡
6.1Hoechst 33342染色法检测K562和HL-60细胞形态变化
6.2 AnnexinV-FITC/PI双染法定量检测化合物3ab诱导的K562和HL-60细胞凋亡率
6.3化合物3ab通过线粒体途径诱导K562和HL-60细胞凋亡
6.4化合物3ab对线粒体凋亡相关蛋白表达的调节作用
6.5化合物3ab增加K562和HL-60细胞内活性氧水平
7.化合物3ab诱导K562和HL-60细胞周期阻滞与G2/M期
8.化合物3ab抑制K562细胞侵袭能力
9.化合物3ab对K562和HL-60细胞自噬水平的影响
10.化合物3ab分子对接模拟实验
11.化合物3ab对K562和HL-60细胞微管蛋白的影响
12.化合物3ab对K562和HL-60细胞微管蛋白的秋水仙碱位点的影响
13.化合物3ab下调K562和HL-60细胞中HDAC6/EGFR/AKT/NF-κB信号通路
14.化合物3ab抑制裸鼠体内K562移植瘤的生长
讨论
结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表和待发表的学术论文
山东大学;