水稻粉质胚乳突变体w4730的表型分析与基因克隆及Wx等位变异新位点的发掘

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摘要

缩略语

第一章文献综述

1．1水稻种子的生长发育

1．2淀粉颗粒的起始和分类

1．2．1水稻胚乳中复合淀粉颗粒的形成

1．3淀粉的结构

1．4淀粉的生物合成

1．4．1ADPG焦磷酸化酶

1．4．2淀粉合成酶

1．4．3淀粉分支酶

1．4．4淀粉脱分支酶

1．4．5参与淀粉的合成的其他基因

1．4．6水稻胚乳突变体的发现和克隆鉴定

1．5水稻突变体的创建

1．5．1自发突变

1．5．2理化诱变

1．5．3插入突变

1．6本研究的目的和意义

第二章材料与方法

2．1材料来源及定位群体构建

2．2粒长、粒宽、粒厚和千粒重的测定

2．3成熟籽粒理化性质测定

2．3．1总淀粉含量的测定

2．3．2直链淀粉含量的测定

2．3．3蛋白质含量的测定

2．3．4脂肪含量的测定

2．3．5支链淀粉链长分布测定

2．3．6尿素膨胀分析

2．3．7RVA测定

2．4成熟种子横切面的扫描电镜观察

2．5基因的图位克隆

2．5．1极端个体DNA提取

2．5．2聚丙烯酰胺凝胶电泳

2．5．3基因精细定位

2．5．4候选基因预测与测序

2．6western杂交步骤

第三章w4730突变体的基因克隆与功能分析

3．1w4730突变体表型考察

3．2突变体成熟种子的扫描电镜观察

3．3w4730突变体成熟籽粒理化性质分析

3．4尿素膨胀实验

3．5支链淀粉链长分布

3．6W4730基因的图位克隆

3．7W4730的突变影响了主要淀粉合酶的蛋白水平

3．8讨论

3．8．1W4730影响淀粉粒发育和淀粉合成

3．8．2W4730是一个参与胚乳发育的关键基因

3．8．3W4730的突变在育种中的应用

3．8．4本研究的创新和不足之处

第四章软米资源Wx等位变异位点的研究

4．1Wx基因复等位变异类型研究进展

4．2材料与方法

4．2．1材料来源

4．2．2软米资源DNA提取

4．2．3软米资源Wx基因测序

4．2．4western杂交步骤

4．383份软米资源Wx基因类型

4．483份软米资源淀粉合酶GBSS1的蛋白水平

4．5讨论

4．5．1Wx基因影响淀粉粒发育和淀粉合成

4．5．2本研究的创新和不足之处

参考文献

在读期间发表论文

附录

致谢