拟南芥COG4与Glo3P型ArfGAP蛋白的互作及其在花粉管生长中的功能研究

目录

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摘要

缩略语

第一章文献综述

1．1被子植物雄配子体的发育

1．1．1小孢子发生

1．1．2雄配子体发生

1．1．3花粉管的生长

1．2囊泡运输及花粉管顶端生长

1．2．1囊泡运输的基本过程

1．2．2囊泡运输在花粉管顶端生长的作用

1．3COG复合体

1．3．1酵母和动物中COG复合体研究进展

1．3．2植物中COG复合体研究进展

1．4ArfGAP

1．4．1Arf小G蛋白

1．4．2酵母和动物中ArfGAP的研究进展

1．4．3植物中ArfGAP的研究进展

1．5本论文的立题依据及研究目的

第二章材料与方法

2．1实验材料

2．1．1植物材料

2．1．2菌株及质粒载体

2．1．3酶、试剂及各种化学药品

2．2实验仪器

2．3实验方法

2．3．1拟南芥种植培养

2．3．2拟南芥总DNA的粗提(Edwards法)

2．3．3拟南芥RNA的提取以及第一链cDNA的合成

2．3．4引物设计和PCR扩增

2．3．5限制性内切酶反应

2．3．7大肠杆菌的转化

2．3．8农杆菌的转化

2．3．9农杆菌浸染拟南芥

2．3．10GUS染色

2．3．11DAPI染色

2．3．12Alexander染色

2．3．13拟南芥花粉体外萌发

2．3．14扫描电子显微镜观察拟南芥花粉

2．3．15拟南芥花粉的高压冷冻切片

2．3．16酵母双杂实验

2．3．17荧光素酶互补成像(LCI)和双分子荧光互补(BiFC)

2．3．18GST Pull-down

第三章实验结果

3．1拟南芥COG4基因的表达和COG4蛋白定位分析

3．2COG4突变导致拟南芥配子体的传递受阻

3．2．2cog4／+突变体的遗传分析和回补

3．3COG4基因的突变影响花粉管的生长

3．3．2cog4突变抑制花粉管的生长

3．4COG4基因的突变影响高尔基体的形态

3．5拟南芥COG4与Glo3p型ArfGAP蛋白互作

第四章讨论

4．1COG4基因在配子体发育中起重要作用

4．2COG4在高尔基体形态维持中发挥重要功能

4．3COG4与G103p型ArfGAP的互作的可能意义

全文总结及研究的创新之处

1 全文总结

2创新之处

3不足之处

参考文献

附录

在读期间发表的论文

致谢