猪萨佩罗病毒分离鉴定及仔猪致病性研究

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第一章文献综述

1猪萨佩罗病毒的生物学特性

1．1猪萨佩罗病毒的分类

1．2猪萨佩罗病毒的形态结构及理化特征

1．3猪萨佩罗病毒的培养特性

1．4猪萨佩罗病毒的基因组结构

2猪萨佩罗病毒的临床症状

2．1猪萨佩罗病毒的临床症状

2．2猪萨佩罗病毒的感染途径与特点

3猪萨佩罗病毒的流行病学

3．1国外猪萨佩罗病毒的流行现状

3．2国内猪萨佩罗病毒的流行现状

4猪萨佩罗病毒的诊断

4．1病毒的分离培养

4．2电镜技术

4．3免疫组织化学

4．4 RT-PCR

4．5巢式PCR

4．8血清学检测

4．9原位杂交技术

5猪萨佩罗病毒的致病机理的研究

6猪萨佩罗病毒的研究意义

第二章PSV的分离鉴定及流行病学调查

1．1材料

1．2方法

2结果

2．1病毒的分离

2．2病毒的噬斑纯化

2．4PSV的RT-PCR鉴定

2．5PSV5’／3’UTR基因组序列

2．6PSV全基因组序列分析

2．7PSV流行病学调查

3讨论

第三章PSV毒株生物学特性及仔猪致病性研究

1材料与方法

1．1材料

1．2方法

2结果

2．1PSV-JXXY-a2株超离纯化及病毒粒子形态观察

2．2猪源抗PSV多抗血清的制备及效价测定

2．4PSV-JXXY-a2株在ST细胞上的感染动力学分析

2．5PSV-JXXY-a2对温度敏感性实验

2．6PSV-JXXY-a2株对不同细胞系的适应性实验

2．7重组质粒标准品的制备

2．8qRT-PCR标准曲线的制作

2．9PSV-JXXY-a2对仔猪致病性试验

3讨论

第四章PSV VP1蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

1材料与方法

1．1材料

1．2方法

2结果

2．1PSV-VP1基因的扩增

2．2重组质粒鉴定

2．4pGEX-4T-1-PSV-VP1的诱导表达

2．5his-VP1的可溶性分析

2．6GST-VP1的可溶性分析

2．8GST-VP1蛋白的纯化

2．9动物免疫水平效价的检测

2．10IFA方法鉴定VP1多抗血清

3讨论

第五章PSV在不同细胞系上对IFN-β表达的影响

1材料与方法

1．1材料

1．2方法

2结果

2．1PSV各蛋白的基因扩增

2．2PSV各蛋白在293T上的表达

2．3PSV对ST细胞IFN-β表达的影响

2．4PSV对293T细胞IFN-β表达的影响

2．5PSV各蛋白对IFN-β-luc启动子的活性影响

3讨论

全文总结

参考文献

常用缓冲液、试剂及培养液的配方

致谢

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