声明
摘要
1 前言
1．1青枯病的研究进展
1．1．1青枯菌的介绍以及研究阶段
1．1．2青枯菌的起源
1．1．3青枯病的发病条件以及症状
1．2复合微生物之间的相互作用
1．2．1植物根际中的定殖
1．2．2复合微生物改善疾病抑制机制
1．3复合微生物的构建原理
1．4复合菌株在土壤中的使用现状
1．5微生物菌肥的应用
1．5．1微生物菌肥的概念及分类
1．5．2复合菌肥的应用前景
1．5．3固体发酵在生物菌肥的应用
1．6研究目的意义
1．7研究内容及技术路线图
1．7．1研究内容
1．7．2技术路线图
2材料与方法
2．1实验材料
2．1．1样品采集
2．1．2供试番茄
2．1．3供试菌株
2．2试剂与仪器
2．2．1试剂与药品
2．2．2主要仪器
2．3培养基及配制方法
2．4土壤放线菌的分离纯化
2．4．1样品的采集及预处理
2．4．2放线菌的分离与合并
2．4．3菌种的保藏方法
2．5复合生防菌的筛选
2．5．1抑制青枯病原菌活性菌的筛选
2．5．2生防菌之间的亲和性测定
2．5．3复合菌株的活性测定
2．6单菌株和复合菌株的防病能力效果
2．6．1菌株的孢子计数
2．6．2菌株孢子悬液和病原菌悬液制备
2．6．3种子表面消毒
2．6．4复合菌株在苗期的防效检测
2．7单菌株及复合菌株的盆栽试验
2．7．1育苗实验
2．7．2离体叶片实验
2．7．3盆栽实验
2．7．4定殖实验
2．7．5营养竞争实验
2．8固体发酵优化和响应面分析
2．8．1种子液的制备
2．8．2固体发酵基质的选择
2．8．3固体发酵基质比例的选择
2．8．4接种量对复合菌孢子量的影响
2．8．5含水量对复合菌孢子量的影响
2．8．6温度对复合菌孢子量影响
2．8．7pH对复合菌孢子量影响
2．8．8响应面优化
2．8．9发酵终点的确定
2．9复合菌肥的生防效果
2．10菌株NEAU-66的鉴定
2．10．1分子水平鉴定
2．10．2NEAU-66的形态和培养特征鉴定
2．10．3生理生化的测定
2．10．4化学分类鉴定实验
3结果与分析
3．1放线菌的分离
3．2抑菌活性的检测
3．2．1活性菌株的筛选及测量
3．2．2亲和性实验和复合菌株的抑菌活性
3．3复合菌株的抗病能力评估
3．3．1番茄苗期的防效结果
3．3．2复合菌比例的选择
3．3．3番茄离体叶片防效结果
3．3．4复合菌株盆栽试验防效结果
3．3．5营养竞争实验
3．3．6定殖实验
3．4复合菌株的固体发酵优化
3．4．1发酵基质的选择
3．4．2基质比例对复合菌株孢子量的影响
3．4．3接种量对复合菌株孢子量的影响
3．4．4含水量对复合菌株孢子量的影响
3．4．5温度对复合菌株孢子量的影响
3．4．6pH对复合菌株孢子量的影响
3．4．7响应面优化
3．5发酵时间的确定
3．6复合菌肥对盆栽的生防效果
3．7放线菌NEAU-66的多相分类研究
3．7．2形态和培养特征鉴定结果
3．7．3生理生化特性
3．7．4化学分类鉴定结果
4讨论
4．1链霉菌的研究意义
4．2复合菌株的生防效果的分析
4．3复合菌的营养竞争分析
4．4复合生物肥的应用
5结论与展望
5．1结论
5．2展望
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
东北农业大学;
