基于PEG介导的遗传转化分析假禾谷镰孢三类转录因子的功能

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致谢

摘要

1文献综述

1．1小麦茎基腐病

1．1．1小麦茎基腐病的发生及影响因素

1．1．2小麦茎基腐病的病原

1．1．3小麦茎基腐病的防治措施

1．2假禾谷镰孢

1．2．1假禾谷镰孢的侵染循环

1．2．2假禾谷镰孢遗传多样性及致病机制研究

1．3转录因子

1．3．1APSES类转录因子

1．3．2锌指蛋白C2H2转录因子

1．3．3bZIP转录因子

1．4丝状真菌遗传转化研究

1．4．1丝状真菌遗传转化常用方法

1．4．2PEG介导的遗传转化的特点

2引言

3材料与方法

3．1实验材料

3．1．1实验材料

3．1．2实验所用的仪器

3．1．3实验相关培养基和试剂的配制

3．1．4主要试剂

3．2实验方法

3．2．4假禾谷镰孢基因组DNA的提取—CTAB法

3．2．5质粒的制备

3．2．6Split-PCR

3．2．7PEG介导的遗传转化

3．2．8阳性转化子的筛选

3．2．9基因缺失突变体PCR检测

3．2．10Southern blot

3．2．11基因回补

3．2．12表型测定

4结果与分析

4．1基于PEG介导的遗传转化分析假禾谷镰孢FpAPSES转录因子的功能

4．1．1FpAPSES蛋白的鉴定与结构分析

4．1．2假禾谷镰孢FpAPSES的表达分析

4．1．2PEG介导的遗传转化构建假禾谷镰孢FpStuA缺失突变体

4．1．3FpStuA缺失影响假禾谷镰孢的营养生长

4．1．4FpStuA参与假禾谷镰孢分生孢子的产生和形态

4．1．5FpStuA缺失突变体的致病性显著降低

4．1．6FpStuA调控DON毒素的合成

4．1．8FpAPSES1和FpAPSES4参与假禾谷镰孢的菌丝生长

4．1．9FpAPSES1和FpAPSES4调控假禾谷镰孢分生孢子的产生和萌发

4．1．10FpAPSES1和FpAPSES4基因缺失影响假禾谷镰孢的致病力

4．1．11FpAPSES1和FpAPSES4参与假禾谷镰孢DON毒素的合成

4．2基于PEG介导的遗传转化分析假禾谷镰孢FpCzf14转录因子的功能

4．2．2PEG介导的遗传转化构建FpCzf14基因缺失及回补突变体

4．2．3FpCzf14参与假禾谷镰孢的菌丝生长和产孢

4．2．4FpCzf14的缺失影响假禾谷镰孢的致病性

4．2．5FpCzf14参与产孢相关基因的表达

4．3基于PEG介导的遗传转化分析假禾谷镰孢Fpkapc转录因子的功能

4．3．1Fpkapc在假禾谷镰孢中的表达及缺失突变体的获得

4．3．2Fpkapc缺失影响假禾谷镰孢的营养生长

4．3．3Fpkapc参与假禾谷镰孢分生孢子的产生、形态和萌发

4．3．4Fpkapc参与假禾谷镰孢的致病力

5结论与讨论

5．2．1PEG介导的假禾谷镰孢遗传转化体系

5．2．2假禾谷镰孢FpAPSES转录因子的功能

5．2．3假禾谷镰孢C2H2锌指转录因子FpCzf14的功能

5．2．4假禾谷镰孢bZIP转录因子Fpkapc的功能

参考文献

附表