FoxO1调控的泛素化对RIG--Ⅰ介导的Ⅰ型干扰素产生的调控机制研究

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摘要

1文献综述

1．1病毒感染与天然免疫

1．1．1病毒基本结构与感染特点

1．1．2天然免疫

1．2抗病毒天然免疫信号转导的调控

1．2．1泛素-蛋白酶体途径

1．2．2磷酸化修饰

1．3．2FoxO1在天然免疫通路中的研究进展

2引言

3材料与方法

3．1实验材料

3．1．1菌种、细胞和质粒

3．1．2主要试剂

3．1．3抗体

3．1．4实验引物汇总

3．1．5主要实验仪器

3．1．6常用溶液配方

3．2实验方法

3．2．1pCMV5-Myc-FoxO1及pCMV5-Myc-FoxO1-ΔDBD重组质粒的构建及鉴定

3．2．2细胞培养

3．2．3实时荧光定量PCR

3．2．4Luciferase启动子活性测定

3．2．5蛋白分析

4结果与分析

4．2．2敲低FoxO1促进SeV诱导的Ⅰ型IFN的产生

4．2．3敲低FoxO1增强NF-κB、ISRE启动子活性

4．2．4过表达FoxO1下调Ⅰ型IFN及其下游基因的表达

4．2．5过表达FoxO1降低IFN-β、NF-κB、ISRE启动子活性

4．3FoxO1通过靶向IRF3调控RIG-Ⅰ信号通路

4．3．1FoxO1对RLR信号通路各分子靶点的调控

4．3．2．FoxO1与IRF3存在相互作用

4．3．3FoxO1-ΔDBD影响FoxO1与IRF3相互作用

4．4FoxO1对IRF3稳定性的影响

4．4．2FoxO1促进IRF3的泛素化

4．4．3FoxO1促进IRF3的K48-泛素化

4．5 FoxO1促进TRIM22／TRIM21介导的IRF3的K48泛素化

4．5．1FoxO1促进TRIM22／TRIM21介导的IRF3的K48泛素化

4．5．2FoxO1通过其DBD调控IRF3蛋白酶体降解

4．6FoxO1抑制TRAF3／TBK1相互作用及TRAF3的K63泛紊化

4．6．2FoxO1抑制TRAF3／TBK1相互作用

4．6．3FoxO1抑制TRAF3的K63泛素化

4．7在SeV感染下FoxO1-ΔDBD可促进Ⅰ型IFN的产生

4．7．2FoxO1-ΔDBD增强IFN-β、ISRE、NF-κB启动子活性

5结论与讨论

5．1结论

5．2讨论

参考文献