黑曲霉单宁酶的异源表达及其在绿茶同步浸提中的应用

目录

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主要符号表

第 1 章 引言

1.1 单宁酶

1.1.1 单宁酶简介

1.1.2 单宁酶的性质

1.1.3 单宁酶的工业应用

1.1.4 单宁酶的生产

1.2 茶饮料现状

1.2.1 绿茶饮料主要营养成分

1.2.2 目前茶饮料存在的问题

1.2.3 单宁酶在茶饮料加工中的应用

1.3 论文的立题依据和研究内容

1.3.1 研究目的与意义

1.3.2 研究内容

第 2 章黑曲霉单宁酶的异源表达及生物信息学分析

2.1 实验材料与仪器设备

2.1.1 菌株

2.1.2 引物

2.1.3 主要试剂

2.1.4 主要培养基与溶液

2.1.5 实验仪器

2.2 实验方法

2.2.1 菌株活化

2.2.2 提取基因组 DNA

2.2.3 单宁酶基因的扩增

2.2.4 Hi-Tail PCR获完整序列

2.2.5 构建克隆载体

2.2.6 构建表达载体

2.2.7 构建重组菌株

2.2.8 重组单宁酶诱导表达

2.2.9 单宁酶活力及生物量的测定

2.3 结果分析

2.3.1 黑曲霉基因组验证

2.3.2 获得单宁酶基因完整序列

2.3.3 单宁酶基因及编码产物生物信息学分析

2.3.4 单宁酶克隆载体 PMD-An-Tan 构建

2.3.5 单宁酶表达载体 pPIC-An-Tan 构建

2.3.6 重组单宁酶菌株构建

2.3.7 重组单宁酶诱导表达

2.4 本章小结

第 3 章重组单宁酶的分离纯化及酶学性质研究

3.1 实验材料与仪器设备

3.1.1 菌株

3.1.2 主要试剂

3.1.3 主要培养基与溶液

3.1.4 实验仪器

3.2 实验方法

3.2.1 重组单宁酶的分离纯化

3.2.2 重组单宁酶酶学性质分析

3.3 结果与分析

3.3.1 重组单宁酶分离纯化

3.3.2 重组单宁酶酶学性质测定

3.4 本章小结

第 4 章 重组单宁酶高温辅助浸提绿茶应用

4.1 实验材料与仪器设备

4.1.1 实验材料

4.1.2 主要试剂

4.1.3 主要溶液及其配制

4.1.4 实验仪器

4.2 实验方法

4.2.1 单宁酶同步浸提绿茶茶汤

4.2.2 单宁酶分步浸提绿茶茶汤

4.2.3 绿茶茶汤成分含量检测方法

4.2.4 酶法辅助同步浸提条件优化

4.2.5 绿茶提取液性质分析

4.2.6 绿茶提取液的生物活性检测

4.3 结果与分析

4.3.1 加酶量及时间对绿茶儿茶素的影响

4.3.2 浸提温度及时间对绿茶儿茶素的影响

4.3.3 浸提方式及时间对绿茶儿茶素的影响

4.3.4 不同浸提方式对绿茶茶汤性质的影响

4.3.5 冷后混现象分析

4.3.6 单宁酶对绿茶提取液生物活性的影响

4.4 章节小结

第 5 章结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

致 谢

参考文献

在学期间科研成果情况