单宁酶基因在黑曲霉ST31中的克隆与表达

摘要

利用PCR扩增得到米曲霉（Aspergillusoryzae）单宁酶（tannase）基因的编码序列，经DNA测序证实单宁酶基因已成功克隆，然后将其连接到黑曲霉的表达载体ANED2-SP2上构建单宁酶基因表达载体。将构建好的单宁酶基因表达载体通过原生质转化法导入黑曲霉菌株ST31中进行表达研究。结果表明重组菌株的单宁酶活力最高为104．02U／ml发酵液，比原始出发菌株米曲霉提高2～3倍。研究构建了黑曲霉的高效转化体系，提高了黑曲霉表达系统的应用水平，为其它新酶的研究提供有价值的参考。