先进校正模型在荧光传感定量分析中的应用研究

摘要

荧光传感技术具有灵敏度高、选择性好、分析速度快等优点，在很多领域中都有着广泛的应用。然而，使用荧光传感技术对复杂样本进行定量分析时，复杂样品中可能存在的固相颗粒的散射效应、荧光背景干扰效应和基质效应、以及仪器光源强度的波动均会严重影响荧光传感技术定量分析结果的准确度。为了解决上述问题，本实验室研究小组针建立了适用于非均相体系荧光光谱数据定量分析的新型荧光定量模型(Quantitave fluorescence model, QFM)和基于广义比率型探针的荧光定量模型(Quantitative fluorescence model for generalized ratiometric probes, QFMGRP)。本论文尝试将这两种新型的荧光定量模型与荧光传感技术相结合，实现复杂样本中待测物质的准确定量检测。论文的主要研究内容包括：　　本论文的第二章综合利用标记了荧光基团和猝灭基团的分子信标探针、链置换扩增技术和基于DNAzyme的信号放大策略，设计了一种可用于碱性磷酸酶检测的荧光传感方法，并将该荧光传感方法与QFM模型相结合，成功实现了对血清样本中的碱性磷酸酶进行灵敏且准确的定量检测。　　本论文的第三章利用核酸适配体对目标物的特异性识别性能，并结合链置换扩增技术发展了一种用于凝血酶检测的荧光传感体系。该荧光传感体系与内标荧光物质丁基罗丹明B一起组成了一种广义比率型荧光传感方法。利用QFMGRP模型对该荧光传感方法所测得的待测样本的荧光光谱数据进行回归分析，实现了血清样本中凝血酶的准确定量检测，其定量分析结果的加标回收率在96.8～105.9%之间。　　本文第四章将铅离子适配体，双链DNA特异性性染料SYBRGreenI与G4染料ZnPPIX相结合，设计一种基于DNA构象转变的比率型荧光传感方法，并将其用于环境水样中铅离子的定量检测。通过采用双激发波长的检测策略，该比率型荧光传感方法所测得的待测环境水样的荧光光谱数据服从QFMGRP模型。因此采用QFMGRP模型对待测环境水样的荧光光谱数据进行分析，能够准确获取样本中所含的铅离子浓度。

目录

声明

第 1 章 绪论

1.1 化学与分析化学

1.2 荧光光谱分析

1.2.1 荧光光谱

1.2.2 荧光光谱分析技术的应用

1.3 化学计量学

1.3.1化学计量学的发展

1.3.2化学计量学校正模型在荧光光谱分析中的应用

1.4 本论文的立项内容与研究意义

第 2 章 新型校正模型用于血清中碱性磷酸酶浓度的荧光传感定量分析

2.1 引言

2.2 理论部分

2.3 实验部分

2.3.1 仪器与试剂

2.3.2 实验样本的配制

2.3.3 仪器参数的设置与

2.4 结果与讨论

2.4.1 实验原理

2.4.2 可行性实验

2.4.3 实验条件优化

2.4.4 选择性分析与定量区间选择

2.4.5 QFM 模型对加标体系的待测物含量的预测

2.4.6 血清中碱性磷酸酶的定量分析

2.5小结

第 3 章 内标法结合比率型荧光定量模型用于血清中凝血酶的定量分析

3.1 引言

3.2 理论部分

3.3 实验部分

3.3.1 药品与试剂

3.3.2 仪器与参数

3.3.3 实验操作

3.3.4 数据分析

3.4 结果与讨论

3.4.1 实验原理

3.4.2 实验条件优化

3.4.3选择性实验

3.4.4定量区间的选择

3.4.5实际加标体系中凝血酶浓度的检测

3.5 小结

第 4 章 非内标法结合比率型荧光校正模型用于环境水样铅离子的定量分析

4.1 引言

4.2 实验部分

4.2.1 药品与试剂

4.2.2 仪器及参数设置

4.2.3实验操作

4.2.4荧光检测

4.3结果与讨论

4.3.1实验原理与可行性分析

4.3.2实验条件的优化

4.3.3离子选择性

4.3.4定量区间的选择

4.3.5双波长监测的荧光定量分析模型对实际样本中的铅的定量分析

4.4小结

结论

参考文献

附录 A 攻读硕士学位期间发表论文

致 谢