一些血清芳香酯酶激动剂及抑制剂的合成和活性

摘要

对氧磷酶1（Paraoxonase1,PON1）是人体内重要的水解酶之一，可以水解对氧磷、芳香酯和内酯等底物。体内血清PON1活性的降低与心脑血管疾病、Ⅱ型糖尿病、癌症等疾病相关。因此预期PON1的激动剂对预防、改善上述疾病有效。生姜具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、增强免疫力等药理作用。课题组前期的研究发现生姜提取物及生姜中的纯组分6-姜烯酚可以激动PON1活性。因此进一步研究确认生姜中PON1的激动或抑制组分作用的大小及机理具有重要意义。对激动剂6-姜烯酚进行衍生以期获得激动作用更强的化合物。　　首先采用以乙酰苯酚为底物的紫外分光光度法和以吖啶酯为底物的化学发光法评价从生姜中筛选出的组分对香豆酸和6-姜酚对血清PON1活性的影响。对香豆酸与6-姜酚均抑制PON1活性，降低了酶和底物之间结合的亲和力。根据抑制常数，IC50，水解动力学常数可知，6-姜酚抑制作用大于对香豆酸，对香豆酸以混合型方式抑制血清PON1水解吖啶酯和乙酰苯酚，而6-姜酚以混合型方式抑制血清PON1水解乙酰苯酚，竞争性地抑制酶水解吖啶酯。　　硝基、甲氧基、羟基等单取代或多取代的苯甲醛与丙酮发生Aldol反应合成6-姜烯酚的短链类似物，有吸电子基取代的苯甲醛与丙酮反应较容易，反应时间更短，但更易生成副产物，难于分离。对合成化合物进行结构表征之后采用以二氢香豆素为底物的紫外分光光度法和以吖啶酯为底物的化学发光法评价其对血清PON1内酯酶和芳香酯酶的活性影响。活性评价发现合成的9个6-姜烯酚短链类似化合物中D1激动血清PON1芳香酯酶活性的作用最强，但弱于6-姜烯酚的激动作用，B2与H1的抑制作用最强，但弱于6-姜酚的抑制作用；G2激动血清PON1内酯酶活性的作用最强，B2的抑制作用最强。　　最后，使用GOLD软件进行分子对接，选用PON1晶体结构（PDB ID：3SRG）建立对接模型，探究各小分子化合物与PON1的亲和力大小，以2-羟基喹啉为对接中心的分子对接结果与活性测试部分结果一致，比较适合抑制剂与PON1的对接。

目录

缩略词表

1 绪 论

1.1.1 简介

1.1.2 血清对氧磷酶和疾病

1.1.3 血清对氧磷酶的激动剂和抑制剂

1.1.4 血清对氧磷酶活性检测方法

1.2.1 简介

1.2.2 分子对接

1.2.3 GOLD程序

1.2.4 PON1的结构特征

1.3 课题研究目的及内容

2 生姜组分对血清PON1 活性影响的评价

2.1 引言

2.2 实验部分

2.2.1 仪器与试剂

2.2.2 实验方法

2.3.1 动力学曲线

2.3.2 抑制剂浓度与抑制强度

2.3.3 抑制剂类型

2.4 本章小结

3 6-姜烯酚短链类似物的合成与活性测试

3.1 引言

3.2 实验部分

3.2.1 仪器与试剂

3.2.2 实验方法

3.3 结果与讨论

3.3.1 反应条件的确定

3.3.2 合成化合物的结构表征

3.3.3 合成化合物的活性测试

3.4 本章小结

4 分子对接

4.1 引言

4.2.1 软件

4.2.2 对接步骤

4.3 结果与讨论

4.3.1 模型的建立与验证

4.3.2 分子对接

4.4 本章小结

5 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

参考文献

附录

A. 作者硕士研究生期间科研成果

B. 化合物的 1H NMR及 13C NMR

C. 学位论文数据集

致谢