密花石斛和景洪石斛离体克隆体系建立及稀土元素对根再生作用研究

摘要

药用石斛是珍稀的中草药资源，具有抗白内障、防止血管硬化、清音利咽和生津益胃等的药效，药用历史悠久。然而，由于人为因素及环境因素等的破坏，导致其资源频临灭绝。寻求保存野生资源并实现资源再生的有效途径迫在眉睫，通过植物离体克隆技术获得再生植株是解决这一问题的理想途径之一。为此，本文主要对密花石斛、景洪石斛两种药用石斛离体克隆体系进行了研究，并考察了稀土元素对密花石斛根再生作用的影响。 植物激素是对植物的生长发育产生显著的调节作用的生理活性物质。本实验以MS为基本培养基，研究了植物激素IBA、NAA、IAA、BA和KT及其组合在密花石斛、景洪石斛的类原球茎(PLBs)诱导、茎再生和根再生的过程中的影响。结果表明：两种石斛在光照((温度(25+1)℃、每天光照16h，光照强度20001x)和暗培养(温度(25±1)℃)条件下均能诱导出类原球茎。其中光照培养条件下，诱导密花石斛茎段外植体形成类原球茎的最佳激素组合是1.0mg/LIBA+2.0mg/LBA，诱导率达到80.4％；而景洪石斛在1.0mg/LIBA+5.0mg/LBA激素组合下诱导率达到最高，为85.7％。暗培养条件下密花石斛和景洪石斛的最佳激素组合分别是1.0mg/LIBA+2.0mg/LBA，2.0mg/LIBA+5.0mg/LBA,诱导率分别为76.9％，79.4％。 以两种石斛的茎段为外植体，光照条件下，诱导茎的再生，结果表明茎的再生方式分为直接发生(外植体上直接诱导成茎)和间接发生(外植体上先形成PLBs，再由PLBs再生茎)两种。直接发生方式中，两种石斛在0.5mg/LIBA、2.0mg/LBA和1.0mg/LNAA+2.0mg/LBA的条件下，茎的诱导频率较高，分别为70.8％、80.0％，84.3％。间接发生方式诱导密花石斛、景洪石斛的茎再生最佳激素组合分别为0.5mg/LIBA+(1.0～2.0)mg/LBA、2.0mg/LIBA、2.0mg/LBA，0.5mg/LIBA+2.0mg/LKT、1.0mg/LIBA+1.0mg/LKT，再生率均达到100.0％。 试验发现，添加马铃薯水提液对基本培养基促进根再生的效果不明显，且MS基本培养基比1/2MS更有利于诱导根再生。IBA对两种石斛根再生的诱导作用效果优于NAA、IAA，当其浓度为5.0mg/L、0.1mg/L时再生率分别为66.4％(密花石斛)、66.0％(景洪石斛)。试验结果亦表明，0.5％的活性炭对两种石斛根再生均有利，当其与植物激素的共同作用时对生根的诱导效果更明显。 稀土元素不是生物体的必需元素，但是它在植物体内表现出的生物效应具有重要的应用价值。本试验对其促进密花石斛试管苗根再生的生物效应进行了研究，结果表明，与稀土元素镧(La3+)、铈(Ce3+)比较，钕(Nd3+)最有利于密花石斛试管苗的根再生(4.0mg/L的Nd3+对应的再生率为100.0％，每苗根数达到23.9)。稀土元素与激素的组合比单独使用稀土元素的效果差。

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文摘

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致谢

第一章绪论

第二章两种石斛类原球茎的诱导

第三章两种石斛的茎再生

第四章两种石斛根的再生

第五章稀土元素对密花石斛试管苗再生根的影响

第六章结论与展望

参考文献