调控黄枸杞花青素生物合成候选基因AN2y的克隆及功能分析

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第一章 文献综述

1.1 枸杞概述

1.1.1 枸杞种植

1.1.2 枸杞的营养成分及功能

1.1.3 红、黑枸杞的研究现状

1.1.4 枸杞分子生物学研究

1.1.5 黄枸杞形态特征、生态环境以及分布区域

1.1.6 黄枸杞研究进展

1.2 花青素

1.2.1 花青素的结构

1.2.2 花青素的功能

1.2.3 花青素生物合成代谢途径

1.2.4 花青素合成相关转录因子

1.3 转录组测序技术

1.4 研究目的及意义

1.5 技术路线

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 植物材料

2.1.2 菌种

2.1.3 载体

2.1.4 培养基

2.1.5 抗生素

2.2 实验试剂

2.3 实验仪器

2.4 PCR扩增所用引物列表

2.5 实验方法

2.5.1 转录组测序

2.5.2 候选基因的生物信息学分析

2.5.3 转基因功能验证

3.1 功能基因挖掘

3.1.2 转录组测序分析

3.2 候选基因的生物信息学分析

3.2.1 AN2y基因的的序列分析

3.2.2 AN2y保守结构域及亲疏水性的分析

3.2.3 AN2y二级结构以及蛋白质跨膜的预测分析

3.2.4 AN2y进化树分析

3.2.5 AN2y多序列比对

3.3 转基因功能验证结果

3.3.1 黄枸杞RNA的提取结果

3.3.2 目的基因克隆

3.3.3 AN2y基因植物表达载体的构建

3.3.4 转基因型烟草的分子鉴定

3.3.5 转基因型烟草的表现观察

3.3.6 花青素含量测定

3.3.7 总黄酮含量测定

3.3.8 烟草RNA的的提取

3.3.9 qPCR反应分分析

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

致谢

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