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【6h】

UBE3A和USP7的mRNA及蛋白表达在涎腺腺样囊

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摘要

前言

实验一 UBE3A、USP7及p53在SACC的mRNA和蛋白的表达

材料与方法

结果

讨论

实验二 UBE3A和USP7及p53在SACC高低转移细胞株中的m RNA和蛋白的表达及意义

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

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致谢

泛素-蛋白酶途径在肿瘤的研究进展 综述

声明

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摘要

目的:本研究旨在探寻涎腺腺样囊性癌中UBE3A,USP7及p53的表达情况和可能的作用及意义;同时探讨涎腺腺样囊性癌中UBE3A,USP7及p53蛋白之间表达的相关性,为泛素化在涎腺腺样囊性癌发生发展中的作用提供参考。  方法:1.利用SP法、RT-PCR和Western blot检测UBE3A、USP7、p53在20例SACC中基因和蛋白层面的表达量,并以癌旁正常组织为阴性对照,分析其表达程度与SACC患者临床病理学资料是否具有一致性。2.利用RT-PCR和Western blot检测UBE3A、USP7和p53在SACC细胞株中基因和蛋白层面的表达量。  结果:1.泛素连接酶UBE3A和去泛素化酶USP7在SACC组织中有表达,且在基因及蛋白层面表达量较对照组高(P<0.05),说明UPS在SACC癌组织中处于活跃状态;UBE3A、USP7与p53表达呈现出一定的负相关性,提示在SACC中UPS可能与p53交叉产生效应。  2.通过多因素logistic回归分析检验证实UBE3A表达、USP7表达是SACC患者远处转移的独立危险因素(P<0.05)。  3.与组织学研究结果相似,RT-PCR和Western blot检测到USP7和UBE3A在ACC-M(肺高转移细胞株)和ACC-2(肺低转移细胞株)中均有表达,但二者测定值在两株细胞株中无明显差异(P>0.05)。  结论:1.UBE3A、USP7、p53在SACC组织及细胞株中均表达。  2.UPS在肿瘤组织中处于活跃状态。  3.UBE3A和USP7可能通过调节肿瘤细胞内关键的抑癌基因p53在SACC的表达,从而达到抗/促进肿瘤生长的目的。  4.UPS在ACC高/低转移细胞株中的表达无差异,UPS可能通过另外的信号通路交叉作用于肿瘤的粘附及转移,由此需要后续实验验证UPS与该类肿瘤的粘附、转移之间的相关性。

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