PPARγ磷酸化在动脉粥样硬化泡沫细胞中的作用机制研究

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声明

缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

1 研究对象和方法

1.1细胞株

1.2 试剂与仪器

1.2.1主要试剂

1.2.2主要仪器

1.3 主要溶液的配制

1.3.1 DMEM 完全培养基

1.3.2 1×磷酸缓冲盐溶液（Phosphate buffer saline，PBS）

1.3.3 MTT溶液配制

1.3.4 油红O溶液的配制

1.3.5 10%十二烷基硫酸钠（Sodium dodecyl sulfate，SDS）

1.3.6 10%过硫酸铵

1.3.7 1×电泳缓冲液

1.3.8 1×转膜缓冲液

1.3.9 PBST缓冲液

1.3.10 封闭液

1.3.11 显影液

1.3.12 定影液

1.3.13 1×TAE缓冲液

1.4 实验方法

1.4.1 Raw264.7巨噬细胞常规培养

1.4.2 MTT法检测细胞增殖

1.4.3 泡沫细胞模型建立

1.4.4 油红O染色和异丙醇萃取

1.4.5 筛选稳定表达PPARγWT和Ser273位点突变型细胞系

1.4.6 Western blot 检测巨噬细胞内PPARγ磷酸化情况

1.4.7巨噬细胞内胆固醇含量的检测

1.4.8 qPCR 检测泡沫细胞形成相关基因及炎症因子的mRNA表达水平

1.4.9 ELISA法检测炎症因子的分泌

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 不同浓度ox-LDL和Roscovitine对Raw264.7巨噬细胞增殖的影响

2.2 泡沫细胞模型的建立和Roscovitine对泡沫细胞形成的影响

2.3 PPARγSer273磷酸化在ox-LDL诱导的Raw264.7巨噬细胞中的作用

2.4 PPARγSer273磷酸化对泡沫细胞形成相关蛋白和基因表达的影响

2.5 PPARγSer273磷酸化对巨噬细胞内炎症因子的分泌和表达的影响

2.6 验证PPARγSer273磷酸化对泡沫细胞形成相关蛋白和炎症因子的调节作用

3 讨论

3.1 动脉粥样硬化泡沫细胞模型和干预剂的选择

3.2 CDK5介导的PPARγSer273磷酸化促进泡沫细胞形成

3.3泡沫细胞形成过程中的脂质摄取和胆固醇外流及其与PPARγSer273磷酸化的关系

3.4 泡沫细胞形成过程中的炎症因子及其与PPARγSer273磷酸化的关系

结论

1. PPARγSer273磷酸化促进泡沫细胞形成

2. PPARγSer273磷酸化通过调节ox-LDL摄取和胆固醇外流促进泡沫细胞形成

3. PPARγSer273磷酸化通过调节炎症反应加速动脉粥样硬化发生发展

4. 通过探讨PPARγSer273 磷酸化在动脉粥样硬化泡沫细胞形成中的作用，为基于此机制的抗动脉粥样硬化药物的应用和研发提供依据

参考文献

综述:巨噬细胞在动脉粥样硬化中的作用

综述参考文献

致谢

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