声明
缩略语/符号说明
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
1.对象和方法
1.1试剂与仪器
1.2 实验对象
1.3 实验分组
1.4 实验方法
1.4.1 SBI模型鼠的制备
1.4.2 小鼠脑组织切片的制备
1.4.3 小鼠脑组织切片免疫荧光染色
1.4.4 小鼠外周血流式细胞术
1.4.5 细胞爬片免疫荧光
1.4.6 实时荧光定量PCR
1.4.9 小鼠神经功能评分
1.4.10 小鼠颅脑核磁共振(MRI)
1.4.11 SBI鼠脑组织水含量评估
1.4.12 小鼠血清炎性因子酶联免疫吸附实验(ELISA)
2.结果
2.1 实验流程示意图
2.2 SBI后鼠中小胶质细胞PD-L1的表达增加
2.2.1 SBI模型鼠脑中小胶质细胞上PD-L1的表达增加
2.2.2 SBI模型鼠外周血中PD-1、PD-L1的表达增加
2.3 体外BV2小胶质细胞中PD-L1的表达
2.3.1 细胞爬片免疫荧光检测BV2细胞Iba-1、PD-L1的表达
2.3.2 流式细胞术检测BV2细胞PD-L1的表达
2.3.3 RT-qPCR检测BV2细胞PD-L1、IL6的表达
2.3.4 ERK抑制剂降低了经LPS活化的小胶质细胞中PD-L1的表达
2.4 PD-L1抗体使SBI鼠预后更差
2.4.1 PD-L1抗体降低了SBI鼠的神经功能评分
2.4.2 抗体加重了SBI 鼠的脑水肿程度
2.4.3 PD-L1抗体干预后SBI鼠核磁共振扫描
2.4.4 PD-L1抗体加剧了SBI鼠外周血中炎症水平
2.4.5 PD-L1 抗体加剧了SBI 鼠中枢神经系统炎症水平
2.5 PD-L1蛋白改善了SBI鼠的预后
2.5.1 PD-L1蛋白未明显改善SBI鼠的神经功能评分
2.5.2 PD-L1蛋白降低了SBI鼠的脑水肿程度
2.5.3 PD-L1蛋白减轻了SBI鼠外周血炎症水平
2.5.4 PD-L1蛋白减轻了SBI鼠中枢神经系统炎症反应
3.讨论
3.1 PD-L1在SBI模型鼠以及LPS激活的小胶质细胞中过表达
3.2 PD-L1抗体干预的SBI鼠预后变差
3.3 PD-L1蛋白改善了SBI鼠的预后
3.4 PD-1/PD-L1信号通路可能通过T细胞影响SBI的预后
3.5 PD-1/PD-L1信号通路可能通过小胶质细胞细胞影响SBI的预后
3.6 本研究的局限性以及以后需解决的问题
结论
参考文献
综述:免疫耐受:继发性脑损伤治疗的新曙光
综述参考文献
致谢
个人简历
天津医科大学;