声明
缩略语/符号说明
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
研究目的
研究方法
一、制备羧甲基壳聚糖修饰的细胞外囊泡负载阿霉素纳米载药系统
1.1对象和方法
1.1.2 主要实验耗材
1.1.3主要实验仪器
1.1.4主要实验试剂
1.1.5 主要试剂配制
1.1.6 细胞的复苏、传代、冻存
1.1.7 Dox@EVs-CMC的制备
1.1.8 透射电子显微镜鉴定Dox@EVs-CMC的形态
1.1.9 动态光散射仪鉴定Dox@EVs-CMC的粒径分布
1.1.10 提取蛋白
1.1.11 BCA 法测定蛋白浓度
1.1.12 Western blot 检测了EVs 标志蛋白CD9、CD63 和CD81 表达情况
1.1.13 高效液相色谱-质谱联用仪测定药物含量及包封率
1.1.14 动态膜透析法测定体外药物释放实验
1.1.15 分析软件
1.1.16 数据统计
1.2结果
1.2.1 透射电子显微镜(TEM)结果
1.2.2 动态光散射仪(DLS)结果
1.2.3 BCA法测定蛋白质浓度
1.2.4 蛋白质印迹法(WB)测定EVs标志蛋白HSP 70、TSG 101和CD 63表达由图 1.3 显示的结果可以看出,在 Western Blotting 结果显示, EVs、
1.2.5 Dox@EVs-CMC中Dox包封率检测
1.2.6 Dox@EVs-CMC中pH响应性释药特性检测
1.3讨论
1.3.1 成功制备Dox@EVs-CMC并验证了其表证
1.3.2 Dox@EVs-CMC具有pH响应性药物释放
1.4小结
二、羧甲基壳聚糖修饰细胞外囊泡包裹阿霉素的体外杀伤肿瘤效果
2.1对象和方法
2.1.2 主要实验耗材
2.1.3 主要实验仪器
2.1.4 主要实验试剂
2.1.5 主要试剂配制
2.1.6 PKH67标记EVs-CMC体外细胞摄取实验
2.1.7 MTS法测定Dox@EVs-CMC的细胞毒性实验
2.1.8 流式细胞仪测定Dox@EVs-CMC的细胞凋亡实验
2.1.9 分析软件
2.1.10 数据统计
2.2结果
2.2.1 PKH67标记EVs-CMC的体外摄取结果
2.2.2 Dox@EVs-CMC的细胞毒性结果
2.2.3 Dox@EVs-CMC的细胞凋亡结果
2.3讨论
2.3.1 PLC/PRF/5细胞能够摄取EVs-CMC
2.3.2 Dox@EVs-CMC对PLC/PRF/5细胞的杀伤作用
2.3.3 Dox@EVs-CMC对PLC/PRF/5细胞的促凋亡作用
2.4小结
三、羧甲基壳聚糖修饰细胞外囊泡包裹阿霉素的体内杀伤肿瘤效果
3.1对象和方法
3.1.3 主要实验耗材
3.1.4 主要实验仪器
3.1.5 主要实验试剂
3.1.6 Hepa1-6皮下荷瘤小鼠模型的建立
3.1.7 DIR标记EVs-CMC体内肿瘤靶向实验
3.1.8 Dox@EVs-CMC的体内抑瘤实验
3.1.9 小鼠组织的HE染色
3.1.10 统计分析
3.2结果
3.2.1 DIR标记EVs-CMC在荷瘤小鼠体内摄取结果
3.2.2 Dox@EVs-CMC的体内抑瘤结果
3.2.3 Dox@EVs-CMC的体内肿瘤HE染色结果
3.2.4 Dox@EVs-CMC的生物安全性体内评估
3.3讨论
3.3.1 EVs-CMC能够靶向荷瘤小鼠体内的肿瘤组织
3.3.2 Dox@EVs-CMC对荷瘤小鼠具有抗肿瘤效果
3.3.3 Dox@EVs-CMC具有良好的生物安全性
3.4小结
结论
参考文献
综述:肿瘤细胞来源细胞外囊泡装载化疗药物新型药物载体的抗肿瘤治疗
综述参考文献
致谢
个人简历
天津医科大学;