除虫脲处理和RNA干扰对柑橘木虱几丁质合成酶A基因的效应机制

目录

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第一章绪论

1 柑橘木虱及防治研究现状

1.1柑橘木虱的生物学特性及发生规律

1.2柑橘木虱的防治研究现状

2 昆虫的几丁质和几丁质合成酶

3 几丁质合成酶抑制剂——除虫脲

4 RNA 干扰

5 研究目的及意义

6 技术路线图

第二章柑橘木虱几丁质合成酶A基因的克隆、序列分析及mRNA的表达分析

1 实验材料

1.1供试昆虫及取样

1.2主要仪器

1.3主要试剂

2 实验方法

2.1柑橘木虱总RNA提取

2.2合成cDNA第一链

2.3柑橘木虱几丁质合成酶A基因保守区域的克隆及测序

2.4柑橘木虱几丁质合成酶A基因中间区域的克隆及测序

2.5柑橘木虱几丁质合成酶A基因 3' RACE和5' RACE扩增

2.6柑橘木虱几丁质合成酶A基因全长的获得

2.7柑橘木虱几丁质合成酶A基因序列的拼接及生物信息学分析

2.8柑橘木虱几丁质合成酶A基因不同发育历期表达的相对RT-qPCR分析

2.9数据统计与分析

3 结果与分析

3.1柑橘木虱几丁质合成酶A基因cDNA全长克隆结果

3.2柑橘木虱几丁质合成酶A基因cDNA全长的生物信息学分析

3.3柑橘木虱不同发育阶段DcCHSA基因的表达分析

4 小结与讨论

第三章不同浓度几丁质合成酶抑制剂除虫脲处理对柑橘木虱五龄若虫几丁质合成酶A基因表达的影响

1 实验材料

1.1供试昆虫及取样

1.2主要试剂及仪器

2 试验方法

2.1除虫脲对柑橘木虱五龄若虫半数致死浓度（LC50）的测定

2.2 高中低三种浓度除虫脲处理后对柑橘木虱五龄若虫 DcCHSA基因表达的相对RT-qPCR分析

3 结果与分析

3.1除虫脲对柑橘木虱五龄若虫半致死浓度（LC50）的测定

3.2除虫脲对柑橘木虱五龄若虫蜕皮的影响

3.3 高中低三种浓度除虫脲处理后对柑橘木虱五龄若虫 DcCHSA基因表达的相对RT-qPCR分析

4 小结与讨论

第四章饲喂双链RNA干扰柑橘木虱五龄若虫几丁质合成酶A基因的表达

1 实验材料

1.1供试昆虫及取样

1.2主要试剂及仪器

2 实验方法

2.1靶点位设计与合成

2.2 dsRNA的合成

2.3柑橘木虱五龄若虫的饲喂法RNA干扰

2.4数据统计分析

3 结果与分析

3.1 dsRNA的合成

3.2 RNAi对柑橘木虱五龄若虫的死亡率及对蜕皮的影响

3.3 RNAi对柑橘木虱五龄若虫DcCHSA基因表达的相对RT-qPCR分析

4 小结与讨论

第五章结论与展望

1 结论

2 展望

致谢

参考文献