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致谢
缩略语
1 引言
2 材料方法
2.1 实验动物
2.2 药品和化学试剂
2.3 实验气体
2.4主要溶液配制
2.4.1 组织细胞裂解液(RIPA,250ml)
2.4.2 30%丙烯酰胺(100ml)
2.4.3 B液(500ml)
2.4.4 C液(500ml)
2.4.5分离胶及浓缩胶制备
2.4.6 10×Running buffer(500ml)
2.4.7 10×Trans buffer(500ml)
2.4.8 10×PBS 溶液配制(500ml)
2.4.9 PCR电泳缓冲液(1000ml)
2.4.10 PCR混合体系(25μL)
2.4.11 50 x TAE(1000ml)
2.4.12 4%多聚甲醛(2000ml)
2.4.13 电生理切片液(500ml)
2.4.14 动作电位记录脑脊液(1000ml)
2.4.15 突触电流记录脑脊液(1000ml)
2.4.16 人脑电生理记录脑脊液(1000ml)
2.5 实验方法
2.5.1电极、套管植入手术
2.5.2耐苯妥英钠难治性颞叶癫痫大鼠模型的建立
2.5.3 caspase-1敲除/过表达病毒注射
2.5.4 免疫印迹实验
2.5.5免疫组化
2.5.6小鼠KA慢性自发癫痫模型
2.5.7在体微电极记录
2.5.8离体电生理
2.5.9 数据统计方法
3 实验结果
3.1 难治性颞叶癫痫大鼠下托激活的caspase-1表达增加
3.1.1大鼠难治性颞叶癫痫模型的建立
3.1.2难治性颞叶癫痫大鼠下托的激活的caspase-1表达水平上调
3.2 下托过表达caspase-1对颞叶癫痫耐药形成的作用
3.2.1下托过表达caspase-1功能验证
3.2.2 下托过表达caspase-1诱导难治性颞叶癫痫的形成
3.3 下调下托的caspase-1干预难治性颞叶癫痫
3.3.1 shRNA下调下托caspase-1的功能验证
3.3.2 shRNA下调下托caspase-1可以逆转难治性颞叶癫痫的耐药
3.3.3 基因敲除caspase-1 对小鼠KA难治性癫痫模型的作用
3.4 药理学手段抑制caspase-1对难治性颞叶癫痫的作用
3.5 抑制下托的caspase-1对下托谷氨酸能神经元的作用
3.5.1 基因和药理学抑制下托caspase-1对在体下托谷氨酸能神经元发放的影响
3.5.2 敲除 caspase-1 对下托谷氨酸能神经元基本膜特性和诱发动作电位特性的影响
3.5.3 敲除caspase-1对下托谷氨酸能神经元突触传递输入兴奋抑制平衡的影响
3.6 Caspase-1抑制剂对难治性颞叶癫痫患者脑片兴奋性的作用
4 讨论
5 结论
参考文献
综述:难治性癫痫的动物模型研究综述
作者简介及在读期间取得的科研成果
浙江大学;