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不同种质白术的内酯含量差异分析及HPCE指纹图谱的初探

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摘要

1 文献综述

1.1 白术药材的研究概况

1.1.1 白术简介

1.1.2 药材鉴别

1.1.3 白术化学成分研究进展

1.1.4 白术的药理作用

1.1.5 现代仪器在白术研究中的应用

1.2.植物次生代谢及其特点

1.2.1 植物次生代谢及途径

1.2.2 植物主要次生代谢物的生物合成途径

1.2.3 植物次生代谢的生态生理作用

1.2.4 植物次生代谢与生态环境的关系

1.2.5 植物次生代谢物的差异性

1.2.6 药用植物次生代谢物与中药材GAP

1.3 高效毛细管电泳在药用植物次生代谢物研究中的应用

1.3.1 高效毛细管电泳的简介

1.3.2 HPCE在药用植物次生代谢物分析中的应用

1.4.课题的研究目的、内容及其意义

1.4.1 课题研究目的

1.4.2 课题研究内容

1.4.3 课题研究意义

2 白术的采集与加工

2.1 采集地的自然条件

2.2 白术的采集

2.3 白术的加工

2.3.1 仪器与材料

2.3.3 实验方法

3 白术水提液的HPCE分析预试验

3.1 仪器与试剂、材料

3.1.1 仪器

3.1.2 试剂与材料

3.2 预试验方法

3.2.1 毛细管的修饰

3.2.2 供试液的提取

3.2.3 电泳条件

3.3 预试验结果

3.4 讨论

4 不同种质白术的内酯含量差异分析

4.1 仪器与试剂、材料

4.1.1 仪器

4.1.2 试剂与材料

4.2 试验方法

4.2.1 毛细管柱的前处理

4.2.2 供试品溶液提取溶剂的选择

4.2.3 对照品溶液的制备

4.2.4 色谱条件的选择

4.2.5 方法学考察

4.2.6 含量测定

4.3 结果

4.3.1 色谱条件的确定

4.3.2 供试品溶液提取溶剂的确定

4.3.3 对照品、供试品及空白试验结果

4.3.4 方法学考察结果

4.3.5 含量测定结果

4.4 讨论

5 白术HPCE指纹图谱的初探

5.1 仪器、试剂与材料

5.1.1 仪器

5.1.2 试剂与材料

5.2 试验方法

5.2.1 毛细管柱的预处理

5.2.2 提取溶剂的选择

5.2.3 色谱条件的选择

5.2.4 方法有效性考察

5.2.5 指纹图谱的建立

5.2.6 数据处理

5.3 结果

5.3.1 样品提取溶剂的选择

5.3.2 色谱条件的确定

5.3.3 方法有效性考察结果

5.3.4 指纹图谱

5.3.5 数据处理结果

5.4 讨论

6 讨论与结论

6.1 讨论

6.1.1 不同种质白术的内酯含量差异分析

6.1.2 白术HPCE指纹图谱的初探

6.2 结论

6.3 创新点与不足

参考文献

附图

个人简介

攻读硕士学位期间发表/投稿的论文

致谢

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摘要

白术(Atractylodes macrocephala Koidz)为菊科,苍术属植物,以根茎入药。白术性温,味甘、苦,归脾、胃经。白术具有补气健脾,燥热利水,固表止汗,安胎之功效,常用于脾胃虚弱,不思饮食;水湿内停,四肢水肿;气虚自汗,胎动不安等。白术药材的主要有效成分为原植物的次生代谢物萜类成分即白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ等和初生代谢物多糖、氨基酸。药用植物次生代谢物有时空差异性、地域差异性、种质差异性和部位差异性,对药材的质量控制有影响。因此,分析同一产地不同种质白术的白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ含量差异性,并通过高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱对白术水溶性代谢物含量及种类差异性作了初步研究,为优良品种的选育提供理论依据。   利用HPCE对浙江上虞产的不同种质白术的次生代谢物萜类成分(白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ)含量进行了分析。用系统聚类分析和判别分析对6个不同种质的白术样品进行了化学模式识别研究。全部样品被准确、快速、高效地测定、分类,其中叶全缘型和全裂型白术的内酯含量较高,即药材品质较好。   建立了白术水溶性代谢物的HPCE指纹图谱分析的色谱条件:采用区带电泳的方式进行分离,紫外分光检测器(UV)检测波长为254nm,运行缓冲液为硼酸和硼砂(PH8.5),分离电压15kV,柱温20℃,采用电动进样,10kV下进样10s,灵敏度为0.001AU,分析时间(记录时间)为25min。   对白术水溶性代谢物HPCE指纹图谱进行了研究,建立了不同种质白术HPCE指纹图谱的共有模式,计算出各样品指纹图谱与共有模式的相似度,并利用共有峰的相对峰面积进行系统聚类分析。结果表明不同种质白术水溶性代谢物的种类和含量均有差异性,其中全缘型和全裂型白术的亲缘关系较近,品质较好。指纹图谱分析结果与HPCE含量分析结果一致。

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