益气补肾法抑制裸鼠乳腺癌骨转移的作用研究

摘要

目的：使用左心室注入法制造裸鼠乳腺癌骨转移模型，确定最佳的造模细胞浓度。观察益气补肾中药对于裸鼠乳腺癌骨转移的抑制作用，为进一步明确作用机制做好前期准备。　　方法：1、将MDA-MB-231细胞株培养后，采用1×106、5×106、1×107个/ml三种不同浓度的细胞悬液，使用左心室注射法，制造乳腺癌骨转移的动物模型，运用ECT检查及病理检测的方法确诊骨转移，确定最佳的细胞浓度并观察造模效果。　　2、运用左心室注射法进行裸鼠乳腺癌骨转移造模后，将20只裸鼠随机分成2组，治疗组采用益气补肾方药灌胃，对照组采用等量的去离子水灌胃治疗，共42天，每3天记录小鼠体重，并根据体重调整药量。42天后使用ECT检查每只裸鼠的骨转移情况，并进行部分的病理检查，采用统计分析，观察益气补肾方药对于乳腺癌骨转移模型的抑制作用。　　结果：1、使用不同细胞浓度的MDA-MB-231细胞悬液进行左心室注射法造模后，三者的造模均较为安全，无一例裸鼠死亡，但1×106、5×106个/ml细胞浓度的造模成功率低，而1×107个/ml细胞浓度造模成功率高，达75％。　　2、裸鼠造模后，治疗组采用益气补肾的经典方药大补元煎，而对照组采用等量的去离子水进行灌胃治疗后，ECT检查提示：治疗组的骨转移发生率为30%，相对对照组80%来说，其骨转移的发生率较对照组要低。　　结论：1、使用MDA-MB-231细胞株，使用1×107/ml的细胞浓度，采用左心室注射法进行乳腺癌骨转移的造模，是安全可靠的，阳性率也较高。　　2、益气补肾方药对于MDA-MB-231细胞株造模的乳腺骨转移模型均具有抑制作用，能有效抑制人乳腺癌骨转移模型的裸鼠骨转移的发生。　　3、通过该试验留存了相应的血液和组织，为进一步检测各项分子指标作好了准备。

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前言

一、材料和方法

（一）、材料

（二）、方法

二、实验：左心室注射法建立乳腺癌骨转移模型

（一）、乳腺癌骨转移模型的复制和检测

（二）、结果

三、实验：益气补肾中药对于裸鼠乳腺癌骨转移的抑制作用

（一）、模型构建和药物试验

（二）、结果

四、讨论

（一）、乳腺癌骨转移模型的造模方法

（二）、乳腺癌骨转移造模过程中使用的细胞浓度

（三）、乳腺癌骨转移实验后检测骨转移的方法

（四）、益气补肾法抗乳腺癌骨转移的作用

（五）通过后期的分子检测来明确益气补肾中药抗骨转移的作用机制

结论

附图

参考文献

致谢

文献综述

参考文献