山楂叶总黄酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织解偶联蛋白2表达的影响

摘要

目的：研究山楂叶总黄酮（TFHL）对大鼠非酒精性脂肪肝炎(NASH)的防治作用及其对大鼠肝组织氧化应激/脂质过氧化反应、解偶联蛋白2(UCP2)表达的影响，探讨 TFHL防治NASH的作用机制。　　方法：50只SD雄性大鼠随机分为5组：正常组、模型组、TFHL高剂量组、TFHL低剂量组、易善复组，每组10只。正常组喂以普通标准饲料，其余各组喂予高脂饲料造模，连续12周；TFHL高、低剂量组在造模的同时以250mg/(kg·d)和125mg/(kg·d)的TFHL灌胃，易善复组在造模同时以195.4mg/(kg·d)易善复混悬液灌胃，正常组及模型组以等容量蒸馏水灌胃。12周后处死大鼠，HE染色后光镜下观察肝脏组织病理学改变；全自动生化仪检测血清甘油三酷(TG)、胆固醇(CHOL)，高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)水平；异丙醇提取、氧化铝吸附磷脂和乙酰丙酮比色法检测肝组织匀浆TG含量；异丙醇提取，高铁、硫酸比色法测定肝组织匀浆CHOL含量；硫代巴比妥酸法检测肝匀浆丙二醛(MDA)含量；黄嘌呤氧化酶法测定肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性；二硫代硝基苯甲酸法检测肝匀浆谷光甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性；比色法测定肝匀浆总抗氧化能力（T-AOC）；ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和肝组织 UCP2蛋白水平；RT-PCR法检测UCP2mRNA的表达。　　结果：　　①高脂喂养12周成功复制了大鼠NASH模型，表现为肝组织重度脂肪肝，伴炎细胞浸润、肝细胞坏死；模型组大鼠肝组织脂肪变程度和炎症程度较正常组显著增强（P<0.01），血清CHOL、LDL、ALT、AST水平和肝组织TG、CHOL含量较正常组明显增高(P<0.01)，血清TG、HDL水平较正常组明显降低(P<0.05，P<0.01)；TFHL高、低剂量组及易善复组大鼠肝组织炎症程度、血清ALT、AST活性较模型组明显降低(P<0.01，P<0.05)，TFHL高、低剂量组肝组织匀浆TG含量较模型组明显降低(P<0.01)，TFHL低剂量组血清HDL水平较模型组明显增高(P<0.05)，但TFHL高、低剂量组及易善复组肝组织脂肪变程度、血清TG、CHOL及肝匀浆CHOL与模型组比差异无显著性(P﹥0.05)，TFHL高剂量组、易善复组血清HDL与模型组比差异无显著性(P﹥0.05)，易善复组肝匀浆TG含量与模型组比差异无显著性(P﹥0.05)；　　②模型组大鼠肝脏SOD、GSH-PX、T-AOC活性较正常组明显下降（P﹤0.01），MDA水平则较正常组显著上升（P﹤0.01）；TFHL高、低剂量组肝组织SOD、T-AOC、GSH-PX活性较模型组明显升高（P﹤0.01，P﹤0.05），而MDA含量则较模型组显著降低（P﹤0.01）；易善复组肝组织SOD、T-AOC活性较模型组明显升高（P﹤0.05，P﹤0.01、）；　　③模型组大鼠血清TNF-α含量较正常组显著增高(P<0.01)，TFHL高、低剂量组及易善复组大鼠血清TNF-α含量则较模型组明显降低（P﹤0.01，P﹤0.05）；　　④模型组大鼠肝组织UCP2 mRNA和蛋白表达较正常组明显增高，TFHL高、低剂量组及易善复组大鼠肝组织UCP2mRNA和蛋白表达则较模型组明显降低(P<0.01，P<0.05)。　　结论：　　①NASH模型大鼠存在着脂质代谢紊乱、肝功能的损伤、氧应激/脂质过氧化反应增强和肝组织UCP2mRNA和蛋白的过表达；　　②TFHL可显著减轻NASH大鼠肝组织炎症损伤，改善肝功能，一定程度上纠正脂质代谢紊乱；　　③TFHL可显著抑制NASH大鼠氧化应激/脂质过氧化反应和肝组织UCP2的过表达，这可能其防治NASH的作用机制之一。

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英文缩略词表

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前言

一、材料与方法

㈠材料

㈡方法

二、结果

㈠各组大鼠肝组织病理学改变

㈡各组大鼠血清转氨酶含量的变化

㈢各组大鼠血脂的变化

㈣各组大鼠肝脏脂质的变化

㈤各组大鼠肝组织匀浆SOD、MDA、GSH-PX、T-AOC水平的变化

㈥各组大鼠血清TNF-α 含量的变化

㈦各组大鼠肝组织UCP2 mRNA及蛋白表达的变化

㈧肝组织 UCP2蛋白表达与肝组织匀浆MDA、SOD、GSH-PX、T-AOC水平及血清TNF-α含量的相关性

三、分析与讨论

五、结论

参考文献

附图

致谢

附:文献综述:非酒精性脂肪性肝病与解偶联蛋白