霍山石斛多糖对香烟烟雾暴露致小鼠肺部炎症的预防研究

摘要

霍山石斛是我国传统的可食用中草药，具有增强机体免疫、抗氧化、抗肿瘤、改善肺功能等多种生物活性。本文主要开展了霍山石斛多糖（DHP）对香烟烟雾暴露致小鼠肺部炎症的预防机制研究。取得的主要研究结果如下:
　　(1) DHP对香烟烟雾暴露致小鼠的表观现象和指标的影响:小鼠体重变化及脏器指数结果表明，香烟烟雾暴露可明显减轻小鼠体重，降低食物摄入量，造成肺组织、肝脏、脾脏和肾脏的损伤;DHP可有效恢复小鼠的体重和食物摄入量，抑制脏器的损伤。
　　(2) DHP对香烟烟雾暴露致小鼠肺部炎症的预防分子机制:小鼠肺组织HE染色研究显示，DHP能显著抑制香烟烟雾诱导的小鼠肺组织炎症细胞浸润，明显降低平均内衬间隔和肺泡破坏指数，从而减轻小鼠肺泡破坏情况;巨噬细胞CD68免疫组化表明DHP能明显减少巨噬细胞在肺组织气管内的聚集。ELISA实验表明，DHP能显著抑制香烟烟雾暴露致小鼠血清和肺组织中促炎因子TNF-α和IL-1β的产生。当DHP剂量为400 mg/kg·day时，血清TNF-α和IL-1β的水平及肺组织中TNF-α和IL-1β的含量分别比模型组减小了13.6％、35.3％、20.2％和21.8％。WesternBlot分析表明，DHP能显著抑制香烟烟雾暴露致小鼠肺损伤中炎性通路MAPK和NF-κB信号通路特征性蛋白P65、P38和JNK的磷酸化程度及IκB的降解，且呈剂量效应关系。EMSA结果表明，DHP可有效阻断香烟烟雾暴露致小鼠肺损伤中NF-κB和AP-1的DNA结合活性，且结合活性随着浓度的增大而逐渐降低。
　　综上所述，DHP通过改善表观现象，调控炎性信号通路，从而抑制炎性因子的过度分泌，抑制肺部炎症的发生。

目录

声明

致谢

摘要

缩写词简表

一 绪论

1．1 肺损伤的研究概况

1．1．1 肺损伤的基本含义

1．1．2 肺损伤的形成因素

1．1．3 肺损伤的机理

1．2 石斛与肺功能保护之间的联系

1．2．1 具有润肺功效的中草药

1．2．2 石斛的活性研究进展

1．2．3 石斛对肺功能保护的研究进展

1．3 本文的研究目的、内容及主要技术路线

1．3．1 研究目的和意义

1．3．2 研究内容

1．3．3 研究技术路线如下图

二 材料与方法

2．1 实验材料及动物

2．2 主要试剂

2．3 主要仪器

2．4 实验方法

2．4．1 霍山石斛多糖的提取

2．4．2 霍山石斛多糖DHP对香烟烟雾致小鼠肺部炎症的预防作用

2．5 数据处理

三 结果与分析

3．1 各剂量DHP对小鼠体重变化的影晌

3．2 各剂量DHP对小鼠食物摄入量水平的变化的影响

3．3 各剂量DHP对小鼠脏器指数的影响

3．4 小鼠肺组织病理学观察及形态定量分析

3．4．1 肺组织形态直观观察

3．4．2 肺组织病理学观察

3．4．3 肺组织形态定量分析

3．5 小鼠肺组织巨噬细胞CD68的免疫组化

3．5．1 肺组织免疫组化病理学观察

3．5．2 肺组织免疫组化炎症评分

3．6 各剂量DHP对小鼠血清和肺组织炎性因子含量的影响

3．7 各剂量DHP对小鼠肺组织炎性通路蛋白表达的影响

3．7．1 各剂量DHP对小鼠肺组织NF-κB信号通路蛋白表达的影响

3．7．2 各剂量DHP对小鼠肺组织MAPK信号通路蛋白表达的影响

3．8 各剂量DHP对小鼠肺组织NF-κB和AP-1信号通路活性的影响

3．8．1 DHP对小鼠肺组织NF-κB的DNA结合活性的影响

3．8．2 DHP对小鼠肺组织AP-1的DNA结合活性的影响

四 讨论

五 结论

5．1 霍山石斛多糖对小鼠肺部炎症的积极干预作用

5．2 展望

参考文献

攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况